[发明专利]一种烟草赤星病菌孢子悬浮液及其应用

摘要

本发明公开了一种烟草赤星病菌孢子悬浮液及其应用，所述的烟草赤星病菌孢子悬浮液是通过病菌分离、病菌培养、诱导产孢、制备孢子悬浮液步骤获得的。所述的烟草赤星病菌孢子悬浮液应用于烟草品种抗感赤星病测定中，或防治烟草赤星病药剂、生防菌或天然产物筛选中，或研究烟草赤星病菌的土壤生态及病菌侵染循环中。本发明采用多点接种方式，培养速度快、培养周期短；利用低温高湿刺激、梯度降温、黑暗诱导等方法的综合作用促进烟草赤星病菌快速、大量的产生孢子，为常规产孢量的50~100倍。本发明方法污染小，培养菌丝、诱导产孢的时间相对固定、集中，同步生长、同步产孢，同批次、不同批次制备孢子量差异小，质量更为稳定。

主权项

一种烟草赤星病菌孢子悬浮液，其特征在于所述的烟草赤星病菌孢子悬浮液是按以下步骤制备的：A、病菌分离：从发病田块中采集有典型症状的烟草病叶，经过分离、纯化、致病力测定筛选出烟草赤星病菌菌种；B、病菌培养：将菌种产生孢子的菌丝点接到培养基平板上，每个平板接种3~4点，在18h黑暗6h光照交替条件下，于27~29℃恒温培养4~6d，选择菌丝呈黑褐色、菌丝较致密的培养物用于诱导产孢；C、诱导产孢：将符合诱导产孢条件的培养基平板密封后置于2~4℃的冰箱内黑暗诱导培养2~3d，然后转入培养箱，黑暗、梯度降温培养，历时2~3d由20℃降温至15℃；D、制备孢子悬浮液：诱导培养完成后，使用促进孢子萌发溶液将培养基平板上的孢子和菌丝洗下，组织捣碎1~2min，使孢子与菌丝分离、孢子从孢子链断开成单孢，然后过滤除去菌丝，滤液即为赤星病菌孢子悬浮液。