[发明专利]一种有机添加物对金线莲产业化快速繁殖关键技术

摘要

本发明提供一种金线莲有机添加物对金线莲产业化快速繁殖关键技术，属于金线莲的大量繁殖和培养技术。本发明选取金线莲顶芽、茎段为材料，在产业化生产过程适时调整添加有机添加物，经过诱导培养，增殖培养，诱导生根后，即可生长成完整植株，生根率可达99%；再经炼苗后，移栽到腐殖土中，成活率可达99%以上。该方法培养增殖时间短、扩繁系数高、一次性成苗、苗健康、金线莲茎干全植株粗大茎粗、根系发达、叶片颜色深厚有明显的绒布状，叶脉金线明晰，成活率高，每株重量达4.5-5.5克，具显著的经济效益。

主权项

一种有机添加物对金线莲产业化快速繁殖关键技术：所述方法具体步骤包括：1）取材：外植体材料为野生金线莲；在春秋季节采摘，采摘后将其用湿布包好带回实验室备用；2）培养基的配制：     芽诱导培养基：MS +BA 0.5‑2.0mg·L‑1+KT 0.5‑2mg·L‑1+NAA 0.5‑2mg·L‑1 + 蔗糖30g·L‑1+活性炭 1‑2g·L‑1+琼脂 6.5g·L‑1；    丛芽诱导培养基：MS+BA 0.5‑3mg·L‑1 +KT 0.5‑2mg·L‑1 +NAA 0.5‑2mg·L‑1 +蔗糖30g·L‑1 +香蕉汁 50‑150 g·L‑1 +蛋白胨 0.5‑2.5g·L‑1 +活性炭 1‑2g·L‑1 +琼脂6.5g·L‑1； 芽增殖培养基：1/2MS+BA 0.5‑3mg·L‑1 +KT 0.5‑2mg·L‑1+NAA 0.5‑2mg·L‑1 +香蕉汁50‑ 150 g·L‑1 +蛋白胨 0.5‑2.5g·L‑1 +花宝1号0.5‑1.5g·L‑1 +蔗糖30g·L‑1 +活性炭0.5‑1.5g·L‑1 +琼脂 6.5g·L‑1；生根培养基：1/3MS+ IBA 0.5‑1mg·L‑1 +NAA 0.5‑1mg·L‑1 +马铃薯浆50‑ 150 g·L‑1 +蔗糖30g·L‑1 +活性炭 0.5‑2g·L‑1+琼脂6.5g·L‑1；所述香蕉汁的制备方法为：将香蕉去皮后粉碎成泥状；所述马铃薯浆的制备方法为：将马铃薯去皮后粉碎成浆状；3）材料消毒处理：将采集的野生金线莲用自来水冲洗干净，在距离芽点1‑2厘米处剪取茎段，去除多余的叶片，置饱和漂白粉上清液中漂洗15min并用软毛刷轻轻刷洗，冲洗干净后，置于流水中冲滴0.5‑1小时，再用双蒸水冲洗2‑3次，在超净工作台内用75%的酒精消毒30s，加入0.1wt%HgCl2处理5‑10min；再用无菌水冲4‑6遍后置工作台备用；4）芽诱导培养：将消毒后的材料放在灭过菌的培养皿上，用手术刀切掉与升汞接触的切口部分0.2‑0.4cm，然后将材料切成1‑2cm 长的茎段分别接种于经高温、高压灭菌的诱导培养基中；培养条件：培养室温度为23±2℃，光照时间12h/d，光照强度500‑1000lx, 芽诱导培养30天；得到丛生芽；5) 增殖培养：将经步骤4）诱导培养所得到的丛生芽切开并剪成长度为1.5‑2cm，分别接种在增殖培养基中；接种时将茎段平放在培养基上，经过50‑70d增殖培养，将增殖后的丛生芽切割为芽数为5‑10个的茎段进行为期50‑70d的扩大增殖培养；整个过程的培养室温度为23±2℃，光照时间12h/d，光照强度1500‑2000lx； 6) 诱导生根：将经步骤5）增殖培养出来的幼苗单株切下，带有2‑3片叶子，株高1‑2cm，转移到生根培养基中；生根培养时间为30天，培养室温度为23±2℃，光照时间12h/d，光照强度1500‑2000lx；7) 瓶苗移栽：经步骤6)诱导生根后，当植株长至10cm时，将试管苗放在自然光下炼苗3‑5天后，再打开瓶盖炼苗2‑3天，然后从培养瓶中取出，洗去附着在根系的培养基，移入质量比蛭石和腐殖土质量比为1：2的混合基质中，温度控制在15‑28℃，湿度保持在70％‑85％之间，避免阳光直射，透光率50%‑60%。