[发明专利]一种珊瑚菜毛状根的诱导增殖方法

摘要

本发明提供了一种珊瑚菜毛状根的诱导增殖方法，它包括获得珊瑚菜无菌苗；培养供感染用的发根农杆菌；转化外植体进行共培养；诱导毛状根发生和毛状根的培养增殖。本发明利用发根农杆菌感染诱导珊瑚菜毛状根的形成，建立离体毛状根培养系统，并分析测定了其药用成分香豆素的含量，与不定根和人工栽培的珊瑚菜根中香豆素的含量进行了对比，以毛状根中香豆素的含量最高，本发明中珊瑚菜毛状根具有生长迅速，周期短，次级代谢产物相对产量高等优点，可用于工业化生产珊瑚菜香豆素；为将来利用毛状根工业化生产珊瑚菜次级代谢产物提供了新的途径，从另一方面保护该濒危植物，有利于维护生态平衡。

主权项

一种珊瑚菜毛状根的诱导增殖方法，其特征在于它包括以下步骤： （1）获得珊瑚菜无菌苗；（2）培养供感染用的发根农杆菌；（3）转化外植体进行共培养：取长势较好的珊瑚菜无菌苗，切取根、叶柄或叶片作为外植体，在其表面划出伤口用于感染，放入发根农杆菌菌液中浸泡，然后放入MS固体培养基中共培养，直至外植体周边出现菌斑； （4）诱导毛状根发生：将出现菌斑的外植体清洗后，放入含有头孢噻肟钠的1/2MS培养基中培养，定期更换1/2MS培养基，在更换的培养基中逐步降低头孢噻肟钠的浓度，直到在完全除掉头孢噻肟钠的1/2MS培养基中继续培养，获得除菌的毛根系； （5）毛状根的培养增殖：将除菌完全、生长快速的毛状根接种在1/2MS液体培养基中，振荡培养增殖，获得大量毛状根。