[发明专利]一种新的腺病毒载体及其生产方法有效
申请号: | 201310064880.4 | 申请日: | 2013-03-18 |
公开(公告)号: | CN103146753A | 公开(公告)日: | 2013-06-12 |
发明(设计)人: | 孙在仁 | 申请(专利权)人: | 山东维真生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/861 | 分类号: | C12N15/861;C12N15/66;C40B40/02 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 250100 山东省济南市高新*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明涉及一种新的腺病毒载体及其生产方法。该载体生产包括两个主要步骤,一是把外源的基因克隆到穿梭载体里面,二是穿梭载体和腺病毒骨架载体的重组。本发明所用穿梭载体是在pShuttle-CMV载体基础上改进的—pCMV-FH;所用腺病毒骨架载体是在现有腺病毒骨架载体内克隆进了一个表达ISceI的酵母基因;所用重组菌株是SW102。本发明穿梭载体克隆方法及穿梭载体和腺病毒骨架载体的重组方法均采用高通量的生产方法。采用高通量穿梭载体的克隆方法和高通量的重组方法重复操作至第五轮就可以把99%的穿梭载体克隆重组到腺病毒载体之内。本发明的高通量腺病毒载体生产方法重组效率高达85-90%,大幅简化实验步骤,时间也大大缩短,且实验成本明显降低。 | ||
搜索关键词: | 一种 病毒 载体 及其 生产 方法 | ||
【主权项】:
一种新的腺病毒载体,其特征在于,一是把外源的基因克隆到穿梭载体里面,二是穿梭载体和腺病毒骨架载体的重组,腺病毒骨架载体内克隆进了一个表达ISceI的酵母基因。
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