[发明专利]一种快速鉴定核盘菌的分子检测方法

摘要

本发明公开了一种快速鉴定核盘菌的分子检测方法，可用于引起菌核病的核盘菌的早期预警和流行监测。该方法利用所述的两对引物在63℃进行恒温扩增，观察扩增产物其颜色变化，进行是否是核盘菌菌株的鉴定；如果扩增颜色显示天蓝色(有产物扩增)为核盘菌菌株，如果显示紫色(无产物扩增)为非核盘菌菌株。本发明实现了恒温扩增，不需要昂贵的仪器设备、繁琐的电泳过程，使检测时间和成本大大降低。与普通PCR相比，本发明还具有灵敏度高、特异性强、检测准确性高等特点。

主权项

1.一种快速鉴定核盘菌的分子检测方法，其特征在于基于环介导恒温扩增技术(LAMP)对核盘菌进行快速鉴定，该方法共分三步： (1)运用引物的特异性进行LAMP恒温扩增，环介导恒温扩增技术(LAMP)反应体系及参数： 反应体系： 反应参数：63℃ 45min，80℃ 10min； (2)对上述LAMP扩增产物观察其颜色变化，并在3.0％琼脂糖凝胶电泳上分离，观察扩增结果； (3)鉴定是否为核盘菌菌株；如果LAMP扩增产物显示天蓝色，这时电泳图谱应为梯状条带，判定为核盘菌菌株；如果扩增产物为紫色，这时电泳图谱无条带扩增，判定为非核盘菌菌株。