[发明专利]编辑家蚕基因组TALE重复区的高效组装方法及其骨架载体有效
| 申请号： | 201310049848.9 | 申请日： | 2013-02-07 |
| 公开（公告）号： | CN103131695A | 公开（公告）日： | 2013-06-05 |
| 发明（设计）人： | 夏庆友;王峰;徐汉福;马三垣;王元成;袁林;赵萍;向仲怀 | 申请（专利权）人： | 西南大学 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12N15/63 |
| 代理公司： | 北京同恒源知识产权代理有限公司 11275 | 代理人： | 赵荣之 |
| 地址： | 400715*** | 国省代码： | 重庆;85 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了编辑家蚕基因组TALE重复区的高效组装方法，具体为：先将含X个碱基的随机序列顺序编号，然后按编号分成Y个组，每组含有1-4个碱基；然后设计扩增TALE重复单元的引物对，该引物对含有无缝连接相邻TALE重复单元的II型限制性内切酶识别位点和特异接头，再利用设计的引物对分别以4种RVD重复单元为模板进行PCR扩增，得PCR产物库；将碱基数为X的靶序列按相同方法进行编号并分组，然后从PCR产物库中取与靶序列编号相同的并识别相应碱基的PCR产物，将同组的PCR产物混合后进行GoldenGate连接，然后将连接产物再进行GoldenGate连接，得含X个重复单元的TALE重复区；利用本发明的方法，不需要合成大量的DNA，成本低，能用于制备编辑家蚕基因组的TALE重复区。 | ||
| 搜索关键词： | 编辑 家蚕 基因组 tale 重复 高效 组装 方法 及其 骨架 载体 | ||
【主权项】：
编辑家蚕基因组TALE重复区的高效组装方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）将含X个碱基的随机序列顺序编号，然后按编号顺序分成Y个组，每组含有1‑4个碱基；其中X大于或等于10；（2）设计扩增TALE重复单元的引物对，所述引物对含有无缝连接相邻TALE重复单元的II型限制性内切酶识别位点和特异接头，然后利用设计的引物对分别以4种TALE重复单元为模板进行PCR扩增，得PCR产物库；（3）将碱基数为X的靶序列按步骤（1）的方法进行编号并分组，然后从PCR产物库中取与所述靶序列编号相同的并识别相应碱基的PCR产物，将同组PCR产物混合后进行GoldenGate连接，然后将各组的连接产物再进行GoldenGate连接，得含X个重复单元的TALE重复区。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于西南大学，未经西南大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201310049848.9/，转载请声明来源钻瓜专利网。
