[发明专利]一种花生离体诱变定向筛选耐盐体的方法

摘要

本发明提供了一种花生离体诱变定向筛选耐盐体的方法，主要步骤是将花生种胚表面消毒；分离胚小叶接种到添加2,4-D和平阳霉素的体胚诱导及诱变培养基中诱变培养处理；将成活的形成体胚的外植体转移到添加了BAP和NaCl的体胚萌发及筛选培养基上，进行定向筛选耐盐体。本发明利用离体诱变结合组织培养定向筛选耐盐体，可节省大量的人力、物力、财力；耐盐体的再生通过胚胎发生途径，体细胞胚起源于一个细胞，可避免耐盐体的嵌合性。本发明以花生成熟种子作为诱变材料可不受季节限制，操作方便，可以创造花生耐盐新种质，丰富花生遗传基础，克服因花生栽培种中缺乏高耐盐性种质资源而使得高产耐盐新品种选育难以突破的困难。

主权项

一种花生离体诱变定向筛选耐盐体的方法，其特征在于包括如下步骤：(1) 将颗粒饱满的花生种子去子叶后的种胚进行表面消毒; (2) 在无菌条件下分离所述种胚的胚小叶作为外植体，接种到体胚诱导及诱变培养基中，进行诱变培养27~30天，部分外植体形成体胚；所述体胚诱导及诱变培养基以MS培养基为基本培养基，并添加4~5mg/L平阳霉素和5~10mg/L 2,4‑D； (3) 将形成体胚的外植体转移至体胚萌发及筛选培养基上培养，进行耐盐定向筛选，得到耐盐苗；所述体胚萌发及筛选培养基以MS培养基为基本培养基，并添加15~20g/L NaCl和4~6mg/L BAP； (4) 在体胚萌发及筛选培养基上获得的耐盐苗生长至1.5～2.5cm时，便可进行无菌嫁接，以耐盐苗为接穗，无菌萌发的花生实生苗为砧木，嫁接苗无菌培养3~4天后，移栽于育苗基质中，经驯化后移栽到田间。