[发明专利]用转基因植物－粉红粘帚霉体系修复污染土壤的方法

摘要

本发明公开了一种利用粉红粘帚霉－转基因植物体系修复重金属、有机物污染土壤，特别是修复重金属-有机物复合污染土壤的方法。其特征在于：将可增强植物有机污染修复效率的外源基因和可提高植物对多种金属耐受力和积累量的外源基因引入植物，构建一种对重金属污染、有机物污染，特别是对重金属－有机物复合污染都有较好修复作用的转基因植物；在种植转基因植物同时，施用粉红粘帚霉，形成粉红粘帚霉－转基因植物体系，从而高效修复被污染土壤。本发明对于以下三种类型的污染土壤都有较好的修复作用:(1)有机污染物如多环芳烃，三氯乙烯、二溴乙烷等卤代烃化合物污染土壤；(2)多种重金属如Cd、Cr、Cu、Mn、Zn及Pb等污染的土壤；（3）重金属-有机物复合污染土壤。其过程包括：转基因植物的构建，阳性植株的筛选及培养，建立粉红粘帚霉－转基因植物体系，进行污染土壤的修复。本发明在重金属污染、有机物污染、重金属-有机物复合污染的土壤修复中具有广阔的应用前景。

主权项

一种利用粉红粘帚霉－转基因植物体系修复重金属、有机物污染土壤，特别是修复重金属‑有机物复合污染土壤的方法，其特征在于在污染土壤中种植转基因植物并施用粉红粘帚霉，建立粉红粘帚霉－转基因植物体系用以修复被污染土壤；所述的粉红粘帚霉（Clonostachys rosea）是一种广泛存在于土壤中的植物病原真菌的重寄生菌，具有植物促生作用，可以促进植物生长发育，提高植物耐旱耐涝、耐高、低温能力，还有较好的生物防治能力，为非致病菌；施用粉红粘帚霉的方式是施用粉红粘帚霉孢子制剂，特别是施用粉红粘帚霉孢子粉剂；粉红粘帚霉分生孢子和厚垣孢子均可施用；施用粉红粘帚霉孢子粉剂的方法有两种：（1）、在转基因植物苗根部区域施用粉红粘帚霉孢子粉剂，使根部区域的孢子浓度为103‑5孢子/克土壤；（2）、用粉红粘帚霉孢子粉剂拌转基因植物种子，拌种用孢子粉剂的孢子浓度为103‑5孢子/克；所述转基因植物是将可增强植物有机污染修复效率的外源基因和可提高植物对多种金属耐受力和积累量的外源基因引入植物，从而获得可修复重金属和有机物复合污染土壤的转基因植物；所述可增强植物有机污染修复效率的外源基因和可提高植物对多种金属耐受力和积累量的外源基因如下：来源于哺乳动物的金属硫蛋白（MT）基因、来源于高等植物的类MT基因或者来源于哺乳动物的细胞色素P450　2E1基因、1‑氨基环丙烷‑1‑羧酸（ACC）脱氨基酶基因、γ‑谷氨酰半胱氨酸合成酶基因（γ‑ECS）；所述的有机物为多环芳烃（PAHs），三氯乙烯、二溴乙烷等卤代烃化合物；所述的重金属为Cd、Cr、Cu、Mn、Zn和Pb；所述的污染土壤为重金属污染的土壤，有机物污染的土壤，重金属‑有机物复合污染的土壤；所述的植物为烟草、花椰菜、紫花苜蓿、印度芥菜。