[发明专利]在丝状真菌宿主细胞中产生多种重组多肽的方法在审
申请号: | 201280052277.8 | 申请日: | 2012-08-23 |
公开(公告)号: | CN103890180A | 公开(公告)日: | 2014-06-25 |
发明(设计)人: | D·亚韦;金绮明 | 申请(专利权)人: | 诺维信股份有限公司 |
主分类号: | C12N15/80 | 分类号: | C12N15/80 |
代理公司: | 北京尚诚知识产权代理有限公司 11322 | 代理人: | 龙淳;顾小曼 |
地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | 本发明涉及构建用于产生具有生物活性的多种重组多肽的丝状真菌菌株的方法。本发明还涉及在丝状真菌菌株中产生具有生物活性的多种重组多肽的方法。本发明还涉及表达具有生物活性的多种重组多肽的丝状真菌菌株。 | ||
搜索关键词: | 丝状 真菌 宿主 细胞 产生 多种 重组 多肽 方法 | ||
【主权项】:
一种构建用于产生具有生物活性的多种重组多肽的丝状真菌菌株的方法,其包括:(a)通过向丝状真菌菌株中导入第一串联构建体,通过靶向整合取代内源性第一基因,所述第一串联构建体包含(i)所述第一基因的同源5’区、其同源侧翼区或其组合,(ii)一个或多个第一可选择性标记物,(iii)与第一启动子和第一终止子可操作连接的编码具有生物活性的第一多肽的第一多核苷酸,(iv)与第二启动子和第二终止子可操作连接的编码具有生物活性的第二多肽的第二多核苷酸,和(v)所述第一基因的同源3’区、其同源侧翼区或其组合;(b)通过向所述丝状真菌菌株中导入第二串联构建体,通过靶向整合取代内源性第二基因,所述第二串联构建体包含(i)所述第二基因的同源5’区、其同源侧翼区或其组合,(ii)一个或多个第二可选择性标记物,(iii)与第三启动子和第三终止子可操作连接的编码具有生物活性的第三多肽的第三多核苷酸,(iv)与第四启动子和第四终止子可操作连接的编码具有生物活性的第四多肽的第四多核苷酸,和(v)所述第二基因的同源3’区、其同源侧翼区或其组合;或(c)(a)和(b)的组合。
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