[发明专利]四种菌的三重实时荧光PCR检测引物、探针、检测试剂盒和检测方法

摘要

本发明公开了一种猪霍乱沙门氏菌、丙型副伤寒沙门氏菌、伤寒沙门氏菌及鸡伤寒沙门氏菌三重实时荧光PCR检测引物、探针、检测试剂盒和检测方法。本发明利用三重实时荧光PCR方法，将猪霍乱沙门氏菌、丙型副伤寒沙门氏菌共有序列用于检测猪霍乱沙门氏菌、丙型副伤寒沙门氏菌，伤寒沙门氏菌的特异序列用于检测伤寒沙门氏菌，鸡伤寒沙门氏菌的特异序列用于检测鸡伤寒沙门氏菌，通过一次实时荧光PCR扩增来判断样品中是否受到猪霍乱沙门氏菌、丙型副伤寒沙门氏菌、伤寒沙门氏菌及鸡伤寒沙门氏菌的污染，再通过单一荧光PCR扩增区分猪霍乱沙门氏菌和丙型副伤寒沙门氏菌，检测快速，可在31h完成从制备样品到出具检测结果的过程，结果可靠，且灵敏度高、特异性强。

主权项

一种猪霍乱沙门氏菌、丙型副伤寒沙门氏菌、伤寒沙门氏菌、鸡伤寒沙门氏菌三重实时荧光PCR检测引物，其特征在于，所述的检测引物如下所示：针对猪霍乱沙门氏菌和丙型副伤寒沙门氏菌的共有序列：SCF：5`‑GATAGGGCTGGTGTTGAAGAG‑3`；SCR：5`‑GGTGCAGATAACTCCAACAGG‑3`；针对伤寒沙门氏菌特异序列：STF：5`‑GTGGCTATGCAGTGAAAATGG‑3`；STR：5`‑CACCAAATTTCACAGCTCCAG‑3`；针对鸡伤寒沙门氏菌特异序列：SGF：5`‑CGATATAGCTTACTGTGTCCCG‑3`；SGR：5`‑TCATGCACTACCACCATAACG‑3`；针对猪霍乱沙门氏菌和丙型副伤寒沙门氏菌的差异序列：SPF：5`‑AGTTGAAGCTGAACAGTCGC‑3、；SPR：5`‑TCGCCAACAGAGACTTTGATC‑3`。