[发明专利]一种具有降血糖活性的低分子量壳聚寡糖磺酰胺衍生物的制备方法

摘要

一种具有降血糖活性的低分子量壳聚寡糖磺酰胺衍生物的制备方法，属于生物化学技术领域。本发明提供了一种快速生产低分子量壳聚寡糖并对其进行化学修饰，使其具有显著降血糖能力的方法，通过醋酸酸解-双氧水氧化偶联法，制备分子量范围在2.5-3kDa之间的壳聚寡糖；以环氧氯丙烷等活化剂进行活化，将壳聚寡糖与甲磺酰胺、苯磺酰胺、邻氨基苯磺酰胺、对氨基苯磺酰胺等连接，在小鼠实验中具有显著的降血糖能力。本发明易操作、成本低、环境污染小、适于大规模应用。

主权项

一种具有降血糖活性的低分子量壳聚寡糖磺酰胺衍生物的制备方法，其特征在于，步骤为：（1）醋酸酸解‑双氧水氧化偶联法制备分子量2.5‑3 kDa之间的壳聚寡糖：调整15‑20g /L的壳聚糖溶液中醋酸终浓度为0.5 mol/L，双氧水质量终浓度为3%，控制反应温度为50℃，反应3小时；（2）环氧氯丙烷活化制备的壳聚寡糖：将步骤（1）制备的壳聚寡糖吸附于DEAE‑Sephadex A‑50介质，使用壳聚寡糖氨基8倍摩尔量的环氧氯丙烷，反应pH为8.0，温度为40℃进行活化；活化时间24‑30小时；（3）利用磺酰胺类化合物对活化后壳聚寡糖进行偶联修饰：将步骤（2）活化的壳聚寡糖与两倍环氧基当量的磺酰胺类化合物偶联，修饰反应条件为pH12， 温度为50℃；所述磺酰胺类化合物选用甲磺酰胺、苯磺酰胺、对氨基苯磺酰胺及邻氨基苯磺酰胺之一种；壳聚寡糖修饰实验在DEAE‑Sephadex A‑50介质上进行； （4）修饰后产物使用Sephadex G‑50进行分子筛层析去除未反应物质；所得低分子量壳聚寡糖磺酰胺衍生物在小鼠实验中具有显著的降血糖能力，与未给药组相比，血糖水平降至70%，均比原始的未修饰壳聚寡糖及磺酰胺类物质具有较高的降血糖能力，降血糖能力提高10%‑20%。