[发明专利]一种在硬水中养殖雨生红球藻的方法无效
申请号: | 201210560096.8 | 申请日: | 2012-12-21 |
公开(公告)号: | CN102978120A | 公开(公告)日: | 2013-03-20 |
发明(设计)人: | 徐青山;骆其君;严小军;谭应宏;陈海敏 | 申请(专利权)人: | 丽江程海保尔生物开发有限公司 |
主分类号: | C12N1/12 | 分类号: | C12N1/12;C12R1/89 |
代理公司: | 昆明正原专利商标代理有限公司 53100 | 代理人: | 陈左 |
地址: | 674202 云南省*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | 本发明公开了一种在硬水中养殖雨生红球藻的方法,其特征是针对硬水进行软化处理,诱变及驯化藻种的适应性,并改变培养液的配方,实现规模化培养,本发明适合于在硬水中大规模养殖雨生红球藻,具有投资小、方便操作的特点,能够充分利用养殖设施的基本功能,降低了生产成本,提高养殖的效率。 | ||
搜索关键词: | 一种 水中 养殖 雨生红球藻 方法 | ||
【主权项】:
一种在硬水中养殖雨生红球藻的方法,其特征是针对硬水进行软化处理,诱变及驯化藻种的适应性,并改变培养液的配方,实现规模化培养,步骤如下:a、对硬水进行软化在自来水中加入褐藻酸钠,配制成体积浓度5%的褐藻酸钠溶液,煮沸3 min,待液体冷却成胶体后,放置在300目的筛绢中,悬挂在需要处理的水体中吸附Ca2+和Mg2+,处理至少12小时,得到软化的培养液;b、诱变及驯化藻种采用处于指数生长期的雨生红球藻的藻液100 mL,离心弃部分上清液使藻液细胞密度每毫升在106个细胞,注入化学诱变剂甲基磺酸乙酯EMS,使雨生红球藻藻液中的EMS最终浓度为 0.3%—0.5%;36℃黑暗条件下处理1小时;4500 rpm离心去除诱变剂EMS,用得到的软化培养液洗涤2次,在24空板中加入软化的培养液,并在培养液中加入105个诱变后的细胞;观察生长情况,反复进行,得到生长迅速的藻种;在生长良好的空板中筛选藻种,继续在a步骤获得的培养液驯化,重复进行3个月,获得能够适应部分软化后硬水的藻种; c、改变培养液的配方采用间接软化的步骤,利用偏磷酸或正磷酸代替磷酸盐,以降低培养液中的Ca2+、 Mg2+离子浓度,同时降低水体的pH值到8.0;在大池培养采用浓度40克/吨的硝酸铵作为氮源,浓度3‑5克/吨的偏磷酸或正磷酸作为磷源;d、改变接种策略,增大雨生红球藻接种量,提高藻种与培养液的比例,按体积重量藻种与培养液的比例为1/4—1/2,按照生长状态,观察藻液呈上浮状态,并分批添加培养液。
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