[发明专利]利用寡核苷酸和氧化石墨烯检测可卡因的荧光检测方法有效
| 申请号： | 201210545622.3 | 申请日： | 2012-12-13 |
| 公开（公告）号： | CN102998292A | 公开（公告）日： | 2013-03-27 |
| 发明（设计）人： | 苗立坤;喻世涛;黄龙;朱巍 | 申请（专利权）人： | 湖北中烟工业有限责任公司;武汉市黄鹤楼科技园有限公司 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64 |
| 代理公司： | 武汉开元知识产权代理有限公司 42104 | 代理人： | 马辉;孙林 |
| 地址： | 430040 湖北省*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种利用寡核苷酸和氧化石墨烯检测可卡因的荧光检测方法，先将染料标记的寡核苷酸探针加入到缓冲溶液中；再加入氧化石墨烯作为固相载体，使寡核苷酸探针吸附到氧化石墨烯的表面，形成寡核苷酸/氧化石墨烯复合物，将染料的荧光信号猝灭；然后加入互补探针进行反应，通过互补探针与寡核苷酸探针的碱基结合作用，形成双链二级结构，使荧光得以恢复；最后加入可卡因进行反应，通过可卡因与互补探针的特异性作用，形成含３个茎状结构的二级结构，使寡核苷酸探针又重新结合到氧化石墨烯的表面，使荧光信号淬灭。本发明通过检测溶液中荧光强度的变化来达到检测可卡因的目的，检测方法简便、快速，具有较高特异性和灵敏度。 | ||
| 搜索关键词： | 利用 寡核苷酸 氧化 石墨 检测 可卡因 荧光 方法 | ||
【主权项】：
一种利用寡核苷酸和氧化石墨烯检测可卡因的荧光检测方法，按以下次序的步骤依次进行：1）将染料标记的寡核苷酸探针加入到缓冲溶液中，对溶液进行荧光检测，记录寡核苷酸探针的荧光发射谱带；2）将氧化石墨烯作为固相载体加入到上述溶液中，使寡核苷酸探针吸附到氧化石墨烯的表面，形成寡核苷酸/氧化石墨烯复合物，将染料的荧光信号猝灭；3）在寡核苷酸/氧化石墨烯复合物中加入互补探针进行反应，通过互补探针与寡核苷酸探针的碱基结合作用，形成双链二级结构，使寡核苷酸探针从氧化石墨烯的表面脱离并且游离在溶液中从而使荧光得以恢复，在激发波长480～490nm，发射波长490～650nm下进行荧光检测，所述互补探针包含一段单链核酸，与寡核苷酸探针碱基互补，无荧光标记；4）在双链探针/氧化石墨烯复合物中加入可卡因进行反应，通过可卡因与互补探针的特异性作用，形成含３个茎状结构的二级结构，使寡核苷酸探针又重新结合到氧化石墨烯的表面，从而使荧光信号淬灭，在激发波长480～490nm，发射波长490～650nm下进行荧光检测。
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