[发明专利]一种白喉类毒素疫苗的制备方法

摘要

本发明公开了一种白喉类毒素疫苗的制备方法，该方法是以白喉杆菌菌株为原料，经过白喉类毒素的培养、菌液分离、超滤浓缩、两次盐析和超滤脱盐等步骤制备而成的。本发明先将培养液用中空纤维滤膜除去菌体，再进行精制，从而减少后续过滤工艺中菌体和其他杂质碎片堆积引起的孔道堵塞；通过改进盐析方法，有效去除了培养液中的毒素蛋白和其他致敏原；培养液的浓缩和盐析后的脱盐方法采用的均是切向流超滤方法，减少了因对毒素蛋白的剪切造成的抗原破坏，避免了蛋白的沉淀。本发明缩短了白喉类毒素疫苗的制备时间，提高了生产效率。

主权项

一种白喉类毒素疫苗的制备方法，其特征在于：将白喉杆菌菌种经传代发酵，甲醛脱毒后，将培养液调节pH至6.9~7.5，然后用孔径为0.22~0.45µm的中空纤维滤膜过滤除去菌体，滤液用孔径为10~40KD中空纤维滤膜进行超滤，直至滤液的体积为原体积的1/8~1/10，然后向滤液中加入质量体积比为25%~27%的硫酸铵盐析，静置24小时后过滤，向滤液中再次加入质量体积比为15%~19%的硫酸铵盐析，静置24小时后离心分离，将离心后的沉淀用注射用水完全溶解后，再次用孔径为10~40KD的中空纤维滤膜进行超滤，直至滤液中硫酸铵的质量百分含量小于0.025%。