[发明专利]一种多克隆位点的人工设计与合成方法无效
申请号: | 201210499204.5 | 申请日: | 2012-11-29 |
公开(公告)号: | CN102978197A | 公开(公告)日: | 2013-03-20 |
发明(设计)人: | 常玉梅;李世国;梁利群;唐然;陶然 | 申请(专利权)人: | 中国水产科学研究院黑龙江水产研究所 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 哈尔滨市松花江专利商标事务所 23109 | 代理人: | 金永焕 |
地址: | 150070 黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | 一种多克隆位点的人工设计与合成方法,本发明涉及多克隆位点的人工设计与合成方法,具体涉及适用于多种表达载体的多克隆位点的合成、克隆与验证。本发明是要解决表达载体含有的MCS序列包含的酶切位点种类有时难以满足特定研究需求,导致特定基因功能分析无法顺利进行的难题。一、选择在表达载体及特定目的基因插入序列中都不存在的酶切位点;二、将两两酶切位点之间以ATAT碱基结构串联,在串联后的碱基序列两端各添加与表达载体克隆区相同的两个酶切位点后得到序列;三、在步骤二中的序列两末端再随机添加2~6个GC或AT碱基,然后送至测序公司合成,即完成了多克隆位点的人工设计与合成。本发明应用于多克隆位点的人工合成领域。 | ||
搜索关键词: | 一种 克隆 人工 设计 合成 方法 | ||
【主权项】:
一种多克隆位点的人工设计与合成方法,其特征在于多克隆位点的人工设计与合成方法按以下步骤实现:一、选择在表达载体及特定目的基因插入序列中都不存在的酶切位点;二、将两两酶切位点之间以ATAT碱基结构串联,在串联后的碱基序列两端各添加与表达载体克隆区相同的两个酶切位点后得到序列;三、在步骤二中的序列两末端再随机添加2~6个GC或AT碱基,然后送至测序公司合成,即完成了多克隆位点的人工设计与合成。
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