[发明专利]一种丹酚酸A纯化方法

摘要

本发明涉及一种丹酚酸A纯化方法，将含有丹酚酸A的洗脱液或提取液；调pH至2.5～4.5，离心，上清液经非极性或弱极性大孔树脂柱层析分离，用水洗脱后，用洗脱剂洗脱，高效液相检测丹酚酸A，收集含有丹酚酸A的洗脱液；将得到的洗脱液用葡聚糖凝胶LH-20或ODS-C18或聚酰胺层析柱分离，用洗脱剂洗脱，高效液相检测丹酚酸A，收集含有丹酚酸A的洗脱液；将得到的洗脱液调pH至2.0～4.0，经有机溶剂萃取，分离有机溶剂相；将得到的溶液用硅胶层析柱分离，用洗脱剂洗脱，高效液相检测丹酚酸A，收集含有丹酚酸A的洗脱液；将得到的洗脱液，减压回收洗脱剂，再加水溶解，微波真空干燥，得进一步纯化的丹酚酸A。

主权项

一种丹酚酸A纯化方法，其特征在于：将含有丹酚酸A的洗脱液或提取液；采用如下步骤进一步纯化：步骤一将所述洗脱液或提取液减压浓缩至每1mL含丹酚酸Al‑10mg，调pH至2.5～4.5，离心，上清液经非极性或弱极性大孔树脂柱层析分离，所述丹酚酸A上样量与大孔吸附树脂比为1∶(35～70)，树脂柱径高比为1∶(4～30)，用水洗脱后，用洗脱剂洗脱，高效液相检测丹酚酸A，收集含有丹酚酸A的洗脱液；步骤二将步骤一得到的洗脱液浓缩至每mL含1‑10mg丹酚酸A的溶液，用葡聚糖凝胶LH‑20或ODS‑C18或聚酰胺层析柱分离，所述丹酚酸A上样量与层析柱比为1∶(5～25)，树脂柱径高比为1∶(4～25)，用洗脱剂洗脱，高效液相检测丹酚酸A，收集含有丹酚酸A的洗脱液，洗脱液减压回收并浓缩成水溶液；步骤三将步骤二得到的水溶液调pH至2.0～4.0，经有机溶剂萃取，分离有机溶剂相，所述的有机溶剂为叔丁基甲基醚、乙酸甲酯、乙酸乙酯、乙酸丁酯或甲酸乙酯；步骤四将步骤三得到的溶液减压回收有机溶剂，制成每1mL含丹酚酸A500～10000mg的萃取液，用硅胶层析柱分离，用洗脱剂洗脱，高效液相检测丹酚酸A，收集含有丹酚酸A的洗脱液，其中所述洗脱剂为石油醚、正戊烷、正庚烷、乙酸甲酯、甲酸乙酯、叔丁基甲基醚组成的两相溶剂；步骤五将步骤四得到的洗脱液，减压回收洗脱剂，再加水溶解，微波真空干燥，所述微波真空干燥温度：20‑100℃，回差温度1‑5℃，真空度‑0.07MPa以上，微波功率1‑100kW，干燥10‑200分钟，得进一步纯化的丹酚酸A。