[发明专利]一种二棱大麦苏啤4号的幼胚离体培养再生植株的方法

摘要

本发明涉及一种二棱大麦苏啤4号的幼胚离体培养再生植株的方法，在愈伤组织诱导培养基上形成愈伤组织后，进行愈伤组织的促分化培养，然后再进行幼苗分化培养和生根培养。其优点是：在愈伤组织诱导培养基中不含植物愈伤组织诱导常用的激素2,4-D,而以低浓度的除草剂Dicamba代替，可以促进诱导较为困难的植物材料在愈伤组织诱导培养基上形成的愈伤组织。在愈伤组织诱导培养基上形成的愈伤组织后，进行愈伤组织的促分化培养，然后再进行幼苗分化培养和生根培养，能将苏啤4号的愈伤组织诱导率提高至100%，将愈伤组织分化率提高到95%以上。

主权项

一种二棱大麦苏啤4号的幼胚离体培养再生植株的方法，包括愈伤组织诱导培养、幼苗分化培养和生根培养，其特征在于：在愈伤组织诱导培养基上形成的愈伤组织后，进行愈伤组织的促分化培养，然后再进行幼苗分化培养和生根培养，具体方法是：    a) 将苏啤4号幼胚在愈伤组织诱导培养基上培养7‑10天，形成良好的愈伤组织；     b)愈伤组织在促分化培养基上培养7‑10天，再转移至分化培养基；   c)在分化培养基上培养15‑20天，获得再生幼苗；    d)再生幼苗转到生根培养基上，培养20左右，形成发育良好的根系,获得完整的再生植株；愈伤组织诱导培养基为：1/2MS培养基+ 2‑4mg/L Dicamba + 1‑2mg/L ABA+ 30g/L蔗糖 + 3g/L植物凝胶，PH调至6.0；促分化培养基为：改良MS培养基 + 1‑2g/L VB1 + 150mg/L 谷氨酰胺 + 30g/L蔗糖 + 3g/L植物凝胶，PH调至6.0； 分化培养基为： 1/2MS培养基 + 3‑5mg/L ZT + 20g/L蔗糖+ 3g/L植物凝胶，PH调至6.0；生根培养基为：1/2MS培养基+0.5 mg/L IAA+0.5g/L麦芽提取物+20g/L蔗糖+ 3g/L植物凝胶，PH调至6.0；愈伤组织诱导培养基、分化培养基和生根培养基中所述的1/2MS培养基是指：MS基本培养基中的大量元素、微量元素、铁盐、有机物质的含量减半；促分化培养基中所述的改良MS培养基是指仅含有大量元素、微量元素和铁盐的MS基本培养基。