[发明专利]一种SPF蛋外源病毒的检验方法有效
申请号: | 201210448180.0 | 申请日: | 2012-11-12 |
公开(公告)号: | CN103123351A | 公开(公告)日: | 2013-05-29 |
发明(设计)人: | 陈景容;吴润生;陈晟生;赖道华 | 申请(专利权)人: | 福州大北农生物技术有限公司 |
主分类号: | G01N33/569 | 分类号: | G01N33/569 |
代理公司: | 福州君诚知识产权代理有限公司 35211 | 代理人: | 戴雨君 |
地址: | 350000 福建省*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | 本发明公开了一种SPF蛋外源病毒的检验方法,包括鸡胚检查法和细胞检查法,其中,鸡胚检查法为:孵化SPF蛋,取9-12日龄鸡胚,并收集尿囊液测血凝,观察鸡胚是否病变,大小是否正常;细胞检查法为:孵化SPF蛋,取9-12日龄鸡胚细胞进行细胞培养,接种尿囊液和卵黄,盲传二代,观察接种后细胞的病变情况,收集部分细胞反复冻融做5种病的抗原检测和做红细胞吸附检验。采用本发明的检验方法,不需到SPF鸡舍采集种鸡血液进行检测SPF蛋的质量,只需采用SPF蛋本身就可检测SPF蛋是否存在外源病毒,进而确认SPF蛋的质量,减少进出SPF鸡舍造成的生物安全风险,便于SPF蛋的应用对象进行SPF蛋外源病毒的检测。 | ||
搜索关键词: | 一种 spf 蛋外源 病毒 检验 方法 | ||
【主权项】:
一种SPF蛋外源病毒的检验方法,其特征在于:所述检验方法包括鸡胚检查法和细胞检查法,其中,鸡胚检查法为:孵化SPF蛋,取9‑12日龄鸡胚,并收集尿囊液,用1%鸡红细胞悬液测尿囊液的血凝情况,观察鸡胚是否病变;细胞检查法为:孵化SPF蛋,取9‑12日龄鸡胚细胞进行细胞培养,当细胞培养成单层后分别接种10‑15日龄尿囊液和卵黄,盲传二代,观察接种后细胞的病变情况,最后一代培养5‑7天,分别取细胞培养所得的尿囊液组细胞和卵黄组细胞做红细胞吸附检验;再分别取细胞培养所得的尿囊液组细胞和卵黄组细胞反复冻融,离心,取上层清液用ELISA试剂盒测淋巴白血病、网状内皮增生症病、鸡传染性贫血病、禽呼肠孤病、禽脑脊髓炎病五种病的抗原,观察检查结果;判定:若鸡胚检查法检测鸡胚发育正常,鸡胚大小无明显差异,无病变或病痕,红细胞全部无血凝现象;细胞检查法检测尿囊液组细胞和卵黄组细胞无细胞病变,无红细胞吸附现象,同时ELISA试剂盒检测结果均为阴性,则表明被检测的SPF蛋无外源病毒,质量合格;若以上其中一项不合格则判定该批蛋不符合SPF蛋要求。
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