[发明专利]一种采用酶解法制取鹿茸多肽干粉的方法

摘要

一种采用酶解法制取鹿茸多肽干粉的方法，属于针对鹿茸中蛋白质提取的方法领域。首先以经过乙醇萃取新鲜鹿茸有效成分后剩余残渣为原料，然后采用一种碱性蛋白酶酶解剩余鹿茸残渣中的鹿茸多肽物质，并进一步转化成低分子量的鹿茸多肽混合物。通过酶解法制备鹿茸残渣中鹿茸多肽物质通过实验检测鹿茸残渣中鹿茸多肽的理化性质，确定鹿茸多肽是分子量范围在500Da～700Da的混合物。我们发现酶解鹿茸残渣中鹿茸多肽粗提取物蛋白质含量比乙醇萃取物蛋白含量提高5倍，本发明不仅为鹿茸的综合利用提供了新的途径，提高了鹿茸生物利用率，而且为进一步开发能促进骨质生长以及预防和治疗治疗骨质疏松等的临床鹿茸多肽药物奠定了必要的基础。

主权项

一种采用酶解法制取鹿茸多肽干粉的方法，其特征是：该鹿茸多肽干粉为淡黄色粉末状，能溶解于水，在4℃保存；该鹿茸多肽干粉的粗蛋白含量为57.6%；该鹿茸多肽干粉为寡肽混合物，70%～80%寡肽的分子量分布在500Da～700Da；该鹿茸多肽干粉的氨基酸组成为：天冬氨酸、丙氨酸、谷氨酸、缬氨酸、丝氨酸、蛋氨酸、组氨酸、异亮氨酸、精氨酸、亮氨酸、甘氨酸、苏氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、赖氨酸；采用酶解法制取鹿茸多肽干粉包括以下步骤:①制备鹿茸多肽的原料为鹿茸残渣，即利用乙醇萃取新鲜鹿茸后剩余的鹿茸残渣为原料；②酶水解取鹿茸残渣10g溶于100ml蒸馏水中，该蒸馏水的温度为50℃，调节为碱性，然后加入0.5ml碱性蛋白酶即枯草杆菌蛋白酶Alcalase，仍保持温度在50℃，碱性条件，酶解1小时后滴加0.05mol/L的氢氧化钠NaOH，维持体系碱性调节；③酶灭活向步骤②中添加氯化氢HCl调节为酸性条件，保持温度为50℃，20分钟酶解结束，采用800rpm~1000rpm×20min离心操作，然后过滤该液体并保存滤液，将滤液冻干后即得到鹿茸残渣酶解的粗提物；④精制将步骤③中所得到的粗提取物依次通过截止分子量为10k、3k，其中k为1000单位的超滤膜，采用Sephadex G‑25凝胶过滤色谱柱及高效液相分离，得到精制的鹿茸多肽产品；⑤干燥将精制鹿茸多肽产品通过冷冻浓缩后，经冷冻干燥制成干粉。