[发明专利]一种基于位点特异性重组的RNA干扰载体及其构建方法和应用有效
| 申请号： | 201210424785.6 | 申请日： | 2012-10-30 |
| 公开（公告）号： | CN103060374A | 公开（公告）日： | 2013-04-24 |
| 发明（设计）人： | 常惠芸;马延滨;丛国正;高闪电;独军政;邵军军;林彤;郝春霞 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院兰州兽医研究所 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N15/64 |
| 代理公司： | 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 11139 | 代理人： | 孙皓晨;韩小雷 |
| 地址： | 730046 甘肃*** | 国省代码： | 甘肃;62 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基于位点特异性重组的RNA干扰载体及其构建方法和应用，属于生物技术领域。本发明所述的干扰载体依次包括以下相连的各部分：与猪的整合素受体β3基因的某单一内含子区域上游进行同源重组的同源重组臂1、人U6启动子序列、多克隆酶切位点、人U6终止子序列、含有PCMV启动子的新霉素抗性基因、与猪的整合素受体β3基因的某单一内含子区域下游进行同源重组的同源重组臂2、复制起始位点基因、氨苄青霉素抗性筛选基因以及用于载体线性化的酶切位点。本发明的干扰载体实现了对猪源细胞基因组的精确打靶，并为筛选提供了方便，同时还可预期插入片段后对基因表达的影响，对后续实验提供了方便。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基于 特异性 重组 rna 干扰 载体 及其 构建 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种基于位点特异性重组的RNA干扰载体，其特征在于所述的干扰载体依次包括以下相连的各部分：与猪的整合素受体β3基因上某单一内含子区域上游进行同源重组的同源重组臂1、人U6启动子序列、多克隆酶切位点、人U6终止子序列、含有PCMV启动子的新霉素抗性基因、与猪的整合素受体β3基因上某单一内含子区域下游进行同源重组的同源重组臂2、复制起始位点基因、氨苄青霉素抗性筛选基因以及用于载体线性化的酶切位点，所述的猪的整合素受体β3基因的GeneBank登录号为NC_010454.3。
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