[发明专利]一种培养皿中筛选烟草抗赤星病种质材料的方法无效
申请号: | 201210408757.5 | 申请日: | 2012-10-11 |
公开(公告)号: | CN102876767A | 公开(公告)日: | 2013-01-16 |
发明(设计)人: | 时焦;孙丽萍;孟坤;张峻铨;雒振宁;王凤龙 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院烟草研究所 |
主分类号: | C12Q1/02 | 分类号: | C12Q1/02 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 266101 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明公开了一种培养皿中筛选烟草抗赤星病种质材料的方法,其中,按照下列步骤操作:a.在一种琼脂培养基上培养烟草赤星病菌;b.于查彼培养液中振荡培养赤星病菌;c.粗提赤星病菌毒素;d.用生物测定的方法确定毒素的活性;e.加水稀释毒素液并制作培养基;f.121℃湿热灭菌含毒素培养基15-30min;g.消毒烟草种子;h.于毒素培养基上培育烟草种子;i.根据烟苗根是否长进培养基中,鉴定出抗烟草赤星病的烟草种质材料。本发明利用烟草赤星病菌产生的毒素制作含毒素培养基,并在此培养基上培养烟草品种的种子,能够快速、经济、方便、可靠的直接从烟草种子中筛选出烟草抗赤星病的种质材料,本方法能够替代田间试验筛选,在培养皿中即可完成筛选烟草抗赤星病种质材料。 | ||
搜索关键词: | 一种 培养皿 筛选 烟草 抗赤星病 种质 材料 方法 | ||
【主权项】:
一种培养皿中筛选烟草抗赤星病种质材料的方法,其特征在于,按照下列步骤操作:a、在一种琼脂培养基上培养烟草赤星病菌;b、将直径为5mm的烟草赤星病菌菌饼接种于250ml查彼培养液中,28℃振荡培养28‑30d;c、纱布过滤除去菌丝体,再经3‑5次离心,8000r/分钟,镜检无细胞,获得毒素粗提液;d、用生物测定的方法确定毒素的活性;e、用水将毒素粗提液稀释2‑16(V/V)倍,加入1.8‑2.0%(W/V)琼脂配成含毒素培养基;f、121℃湿热灭菌含毒素培养基15‑30min;g、消毒烟草种子;h、用镊子将消毒后的烟草种子夹取到含毒素的培养基上,封口膜封口,于25‑28℃、12h光照/d培养条件下,培养14d以上;i、根据烟苗根是否长进培养基中,鉴定出抗烟草赤星病的烟草种质材料。
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