[发明专利]生物样本中美他卡韦及其代谢产物浓度的检测方法

摘要

本发明提供了生物样本中美他卡韦及其代谢产物浓度的检测方法。该方法将美他卡韦和代谢物与替硝唑（内标）经乙酸乙酯萃取，采用UPLC-MS/MS法进行分离测定。本发明的方法经方法学验证准确可靠，可用于生物样本中美他卡韦及其代谢产物的含量的分析。

主权项

生物样本中美他卡韦及其代谢产物浓度的检测方法，其特征在于包括以下步骤：(a)对生物样品进行前处理：取待测样品，加入内标和乙酸乙酯进行液液萃取，并取上清液吹干，复溶，取上清液，所述的内标为替硝唑溶液，所述的替硝唑的用量为使每1L样品中含替硝唑重量为18‑22μg，所述的乙酸乙酯的用量为使每1L样品使用乙酸乙酯体积为3.0‑6.0L；(b)采用UPLC/MS/MS联用仪测定上述上清液中美他卡韦、2，3‑双脱氧鸟苷和O6‑甲基鸟嘌呤的浓度，其中，UPLC/MS/MS联用的色谱条件是：色谱柱是用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；内标法，以替硝唑作为内标；流动相为甲醇‑醋酸铵水溶液的混合液，其比例范围为（72±4）:（28±2），醋酸铵水溶液浓度为每1L水中含醋酸铵重量为7.8‑38.5mg，pH为6.5‑7.5，UPLC/MS/MS联用的质谱条件是：离子源为ESI离子源，正离子检测。