[发明专利]一种利用幼胚拯救获得一品红杂交后代的方法

摘要

本发明公开了一种利用幼胚拯救获得一品红杂交后代的方法。该方法取人工杂交授粉后15～22d的胚珠采用离体培养进行幼胚拯救，具体步骤包括：(1)胚珠剥取，(2)诱导培养，(3)继代、增殖与生根培养，(4)移栽。该发明有效避免了一品红杂种胚早衰，提高了一品红杂交后代的杂种成活率，缩短了一品红杂交后代的培育周期，可在一品红杂交育种中应用。

主权项

一种利用幼胚拯救获得一品红杂交后代的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)胚珠剥取：取一品红杂交授粉后15～22d的子房，流水下冲洗5min，在无菌条件下，用体积比75％的乙醇浸泡1min，再用质量百分比为0.1％升汞溶液中消毒10min，无菌水冲洗4～5次后用镊子撕拨开子房壁，轻轻剥出胚珠；(2)诱导培养：在无菌条件下，迅速将剥出的胚珠接种到MS+NAA 0.5mg/L+6‑BA 0.5mg/L培养基，培养基pH 5.6‑5.8、蔗糖60g/L、琼脂6g/L，在温度20～25℃、光周期10～12h/d、光照强度1500～2000lux下培养诱导胚芽萌发；(3)继代、增殖与生根培养：30～45d后转入MS+NAA 0.05mg/L+6‑BA 0.1mg/L培养基中继代培养，得到幼苗后切取茎段和顶芽转入MS+NAA 0.1mg/L+6‑BA 0.5mg/L培养基中扩繁，待增殖数量达到目标数量时转入1/2MS+NAA 0.1mg/L培养基上生根。上述培养基pH 5.6～5.8、蔗糖30g/L、琼脂6g/L，培养条件同(2)；(4)移栽：将根系发育良好的无菌苗在室内自然光下开瓶炼苗3～4d，镊子夹取试管苗洗净附着在表面的培养基，移栽到泥炭∶珍珠岩∶蛭石＝1∶1∶1的穴盘中，置于温室中保持90～95％相对湿度、20～25℃温度培养，30d左右带土上盆移栽，正常管理。