[发明专利]一种B族链球菌(GBS)核酸检测试剂盒及检测方法

摘要

本发明公开一种B族链球菌(GBS)核酸检测试剂盒及检测方法，该试剂盒含有：单引物等温扩增反应酶（SPIA）：BstDNA聚合酶，RNaseH；SPIA反应液：dNTPs，引物，Bst酶Buffer，RNaseHBuffer；RIDA反应体系：切刻内切酶选择Nb.BtsI及探针；SSPIA反应引物：P1．5'-3'UCGAUCAUGTTAGCCGC、5'端后八个碱基是RNA其余碱基是DNA，RIDA探针:5'-3’GCTGAGTCCCCTTTCTTGACAAT，内质控SPIA引物：P2.5'-3'CUGUCGAUCGCAATCGG、5'端后八个碱基是RNA其余碱基是DNA，内质控RIDA探针：5'-3'GACCGAGTCTATCGGCCAGCTAC，内质控为插入了人GAPDH基因的质粒DNA。本发明采用SPIA与RIDA技术相结合的方法检测B族链球菌(GBS)核酸序列的方法，具有灵敏，特异，快速的优点。

主权项

一种B族链球菌(GBS)核酸检测试剂盒，其特征在于，该试剂盒含有：SPIA反应酶：Bst DNA聚合酶； RNase H；SPIA反应液：dNTPs , 引物, Bst酶Buffer, RNase H Buffer；RIDA反应体系：切刻内切酶选择Nb.BtsI；SPIA反应引物：P1．5'‑3'UCGAUCAUGTTAGCCGC  5'端后八个碱基是RNA， 其余碱基是DNA，RIDA探针:5'‑3’ GCTGAGTCCCCTTTCTTGACAAT， 内质控SPIA引物：P2. 5'‑3'CUGUCGAUCGCAATCGG  5'端后八个碱基是RNA， 其余碱基是DNA，内质控RIDA探针：5'‑3'GACCGAGTCTATCGGCCAGCTAC，内质控为插入了人GAPDH基因的质粒DNA，内质控同被检测样本同时参与DNA提取过程；空白对照为DEPC水；阴性对照为甲型溶血性（草绿色）链球菌DNA，大肠杆菌DNA；阳性对照为B族链球菌(GBS)DNA。