[发明专利]一类磁共振成像显像剂和双光子成像显像剂及其制备方法

摘要

本发明公开了一类磁共振成像和双光子成像显像剂的制备方法，特征是先合成赖氨酸-半胱氨酸-精氨酸-精氨酸-缬氨酸-精氨酸肽段和缬氨酸-精氨酸-半胱氨酸-精氨酸-赖氨酸-精氨酸肽段，与2-氨基-6-氰基苯并噻唑连接后接上大环化合物，在缓冲溶液中与金属离子反应得到五种化合物：第一种化合物的最终产物A1、第二种化合物的最终产物A2和第五种化合物的最终产物A5是磁共振成像显像剂，第三种化合物的最终产物A3和第四种化合物的最终产物A4是用于双光子成像显像剂。由于是小分子，亲水性好，制备容易，具有高摄取的优势；且第一种化合物的最终产物A1和第三种化合物的最终产物A3有特定酶特异性识别的肽段，具有高靶向的优势。

主权项

一类磁共振成像显像剂和双光子成像显像剂中的第一种化合物的最终产物A1的制备方法，其特征在于：按：将1毫摩尔2‑氯三苯甲基氯树脂在4‑6毫升N，N‑二甲基甲酰胺里溶胀4‑8分钟后，加入2毫摩尔N‑芴甲氧羰基‑N'‑叔丁氧羰基‑L‑赖氨酸，再加入2毫摩尔N，N‑二异丙基乙胺，反应2‑3小时后，用100微升甲醇反应10‑20分钟，切去赖氨酸的保护基，加入活化的1.6毫摩尔第二个氨基酸半胱氨酸反应2‑3小时，切去半胱氨酸的保护基，加入活化的1.6毫摩尔第三个氨基酸精氨酸反应2‑3小时，切去精氨酸的保护基，加入活化的1.6毫摩尔第四个氨基酸精氨酸反应2‑3小时，切去精氨酸的保护基，加入活化的1.6毫摩尔第五个氨基酸缬氨酸反应2‑3小时，切去缬氨酸的保护基，再加入活化的1.6毫摩尔第六个氨基酸精氨酸反应3‑4小时，切去最后一个氨基酸精氨酸的保护基，加2‑3毫摩尔醋酐反应20‑30分钟，最后用含体积浓度为1%的三氟乙酸的二氯甲烷从该树脂上切下上述合成的肽段，用乙醚层析出冷冻离心倾去上层乙醚，待溶剂挥发干之后所得到的白色固体粉末即是赖氨酸‑半胱氨酸‑精氨酸‑精氨酸‑缬氨酸‑精氨酸肽段；将上述合成的赖氨酸‑半胱氨酸‑精氨酸‑精氨酸‑缬氨酸‑精氨酸肽段取0.1毫摩尔溶于2‑4毫升四氢呋喃溶剂中，加入0.15毫摩尔N‑甲基吗啡，冷却至零度时加入0.12毫摩尔氯甲酸异丁酯，活化半小时后，加入0.12毫摩尔2‑氨基‑6‑氰基苯并噻唑，保持温度在0‑10℃一个小时，室温搅拌反应8‑9小时，经过高效液相色谱分离提纯，收集在紫外320纳米处有强吸收的组分，即为第一种初产物X1；先将上述制备的第一种初产物X1溶解在10毫升体积浓度为95%的三氟乙酸的二氯甲烷溶液中搅拌反应3‑5小时，经过高效液相色谱分离提纯，收集在紫外320纳米处有强吸收的组分即为第一种纯化产物X2；再将0.1毫摩尔三叔丁基1,4,7,10‑四氮杂环十二烷‑1,4,7,10‑四乙酸用0.1毫摩尔1‑羟基苯并三唑和0.1毫摩尔苯并三氮唑‑N,N,N',N'‑四甲基脲六氟磷酸盐和0.3‑0.5毫摩尔N，N‑二异丙基乙胺活化5分钟后，加入0.1毫摩尔上述制备的第一种纯化产物X2中，室温搅拌反应3‑5小时，经过高效液相色谱分离提纯，收集在紫外320纳米处有强吸收的组分即为第一种次纯化产物X3；然后将上述制备的第一种次纯化产物X3溶解在10毫升体积浓度为95%的三氟乙酸的二氯甲烷溶液中搅拌反应3‑5小时，经过高效液相色谱分离提纯，收集在紫外320纳米处有强吸收的组分即为第一种再纯化产物X4；最后将上述制备的第一种再纯化产物X4 0.1毫摩尔溶于3‑5毫升水，用碳酸钠调节此溶液的pH值在6‑7，加入1毫摩尔氯化钆，室温搅拌反应3‑5小时，经过高效液相色谱分离提纯，收集在紫外320纳米处有强吸收的组分即为第一种化合物的最终产物A1。