[发明专利]一种以CD3+CD8+为主的活化淋巴细胞的扩增、冻存及复苏方法无效
| 申请号： | 201210339583.1 | 申请日： | 2012-09-13 |
| 公开（公告）号： | CN102839153A | 公开（公告）日： | 2012-12-26 |
| 发明（设计）人： | 高恒亮;郭栋 | 申请（专利权）人： | 济南泰生生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0783 | 分类号： | C12N5/0783;A01N1/02 |
| 代理公司： | 济南诚智商标专利事务所有限公司 37105 | 代理人： | 韩百翠 |
| 地址： | 250000 山东省济南市*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种以CD3+CD8+为主的活化淋巴细胞的培养、冷冻及复苏方法，可以解决患者为连续使用活化的CD3+CD8+为主的淋巴细胞而需多次采血的问题。其包括：（1）通过将外周血样提取出的淋巴细胞与IL-2，IL-15，抗CD3抗体，抗CD28抗体接触，以扩增活化的以CD3+CD 8+为主活化淋巴细胞；（2）活化淋巴细胞的冻存；（3）活化淋巴细胞的复苏。本发明所培养的活化淋巴细胞成分清晰，CD4+CD25+Treg细胞含量极少，并含有大量的CD8+T淋巴细胞，可以根据病人其他治疗如放疗化疗来调整活化淋巴细胞的回输时间和次数，以更好的治疗肿瘤，感染性疾病以及免疫缺陷症等疾病。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 cd3 cd8 为主 活化 淋巴细胞 扩增 复苏 方法 | ||
【主权项】：
一种以CD3+CD8+为主的活化淋巴细胞的扩增方法，其特征是，（a）将外周血血样中分离出的单个核细胞在含有淋巴细胞激活剂和细胞因子IL‑2的培养基中培养；所述淋巴细胞激活剂为抗CD3抗体和抗CD28抗体，抗CD3抗体的终浓度为0.1‑100ng/ml；抗CD28抗体的终浓度为0.1‑50ng/ml；所述IL‑2终浓度为100U/ml至5000U/ml；（b）将（a）步骤中培养得到的淋巴细胞用mini MACS磁珠分选去除CD4+CD25+Treg细胞；（c）将（b）步骤中培养得到的淋巴细胞在含有细胞因子IL‑2和IL‑15的培养基中培养；所述IL‑2终浓度为50‑500U/ml，IL‑15的终浓度为10‑500ng/ml；（d）收集（c）步骤中得到的淋巴细胞用于回输或冻存。
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