[发明专利]一种利用离体叶片鉴别辣椒耐热性的方法

摘要

本发明公开了一种利用离体叶片鉴定辣椒耐热性的方法，包括以辣椒耐热品系B35为耐热对照，以辣椒不耐热品系B6作为热敏对照的选定，辣椒离体叶片的耐热性鉴定方法，离体叶片热害分级标准与群体热害分级标准的制定等，其特征在于，在特定温度和时间处理下的辣椒离体叶片，不同耐热品系间在叶片表观症状上存在明显差异，以此通过计算待检某一品系群体的热害指数，并根据制定的群体热害分级标准，能鉴定出辣椒耐热性品系和热敏性品系。这一方法特别适宜于株系群体小，以及转基因株系等珍贵辣椒育种株系的耐热性鉴定与遗传分析，是一种操作简单、快速、有效鉴定大量辣椒种质资源耐热性的方法，能极大地加快辣椒耐热育种进程。

主权项

一种利用离体叶片鉴别辣椒耐热性的方法，其特征在于，该方法利用辣椒7～8叶幼苗期离体带柄功能叶，在人工气候箱中进行耐热性鉴定，根据创制的辣椒离体叶热害分级标准统计、计算待检某一品系的群体热害指数，并根据制定的群体热害分级标准，确定待鉴定辣椒品系的耐热性，具体步骤如下：1）选择辣椒耐热品系B35为耐热对照，辣椒不耐热品系B6作为热敏对照；2）将耐热性未知的待检辣椒材料种子，以及耐热对照和热敏对照的种子，分别经55℃温汤浸种20min，清水浸泡5h，28℃，全黑暗人工气候箱中进行催芽，经4d种子露白，播于穴盘中；然后将穴盘置于昼夜温光周期条件下进行培养，所述的昼夜温光周期条件为：相对湿度50%～70%，光照3000～4000lx，白天温度25℃～30℃，16h，夜间温度18℃，8h，培养期间浇Hoagland′s营养液；3）待幼苗长至7～8片真叶时，选取辣椒子叶上方第4、5、6片生长正常的带柄功能叶作为鉴定其耐热性的样品，每个待检辣椒品系供试离体叶样品10片，重复3次；4）将采集的辣椒功能叶按待检辣椒品系编号，插入装满蒸馏水的250mL三角瓶中，在三角瓶壁上用记号笔标明待检辣椒品系编号；然后，将插有待检样品的三角瓶立即置于38℃的光照培养箱中，光照3000～4000lx，连续光照处理60h后，统计热害指数；在鉴定期间，每天检查三角瓶中水位并及时补加蒸馏水，使离体的辣椒功能叶的叶柄一直浸在水中；5）按照以下辣椒离体叶片耐热性鉴定分级标准统计待检辣椒品系叶片级数：0级：全叶青绿，无热害症状；1级：叶片失水，轻度萎蔫；3级：叶片轻度失绿，轻度萎蔫；5级：全叶转色为浅黄绿色，叶片萎蔫，叶尖部分坏死；7级：全叶转色为黄绿色，叶尖坏死，叶缘翻卷；9级：全叶发黄，叶尖叶缘重度坏死焦枯，叶缘重度翻卷；6）按下式计算热害指数：热害指数=∑（各级热害指数叶片数×该热害级别值）÷（调查总叶片数×最高级值）×100；热害指数计算时，如重复间差异不显著，取3次重复的平均值；如差异显著，再重复3次，取其3次差异不显著的平均值作为该检测辣椒耐热性品系的热害指数；最后，根据以下群体分级标准确定待测辣椒品系的耐热性：热害指数≤35.0为耐热品系；热害指数在35.1~59.9为较耐热品系；热害指数≥60.0为热敏品系。