[发明专利]一种能够表达人抗体的转基因动物的制备方法

摘要

本发明涉及能产生人抗体的小鼠的制备方法，该方法包括将携带包含人抗体重链基因座的部分片段的转基因小鼠，与携带插入到小鼠基因组DNA中具有未经重排的人抗体轻链基因座部分片段的小鼠杂交，所述人抗体重链和轻链基因座在转基因小鼠中可以进行基因重排和基因转变，以产生各种人源免疫球蛋白。其中小鼠内源抗体重链基因座、小鼠内源抗体κ轻链基因座和Lamda轻链基因座被失活。

主权项

一种能产生人抗体的小鼠的制备方法，所述小鼠携带两个人免疫球蛋白基因座部分片段，具体的含有未经重排的人抗体重链和轻链基因座片段，其中未经重排的人抗体重链基因座的部分片段包含至少一个非重组过的可变区基因(V)、D区基因(D)、连接区基因(J)和恒定区基因(C)以及重链基因座的3’‑增强子核心序列，未经重排的人抗体轻链基因座片段是人抗体轻链κ基因座片段，包含至少一个非重组过的可变区基因(V)、连接区基因(J)和恒定区基因(C)以及轻链基因座的3’‑增强子核心序列；所述未经重排的人抗体重链和轻链基因座部分片段分别以150‑250kb大小的片段形式以细菌人工染色体(BAC)为载体被克隆，经BAC克隆载体被导入小鼠基因组并插入到小鼠基因组DNA中；该方法具体包括将携带位于14号染色体上的人免疫球蛋白重链基因座的部分片段的转基因小鼠，与携带插入到小鼠基因组DNA中具有未经重排的位于2号染色体上的人免疫球蛋白轻链基因座部分片段的小鼠杂交，进行基因重排和基因转变，以产生人源免疫球蛋白，其中小鼠内源抗体重链基因座、小鼠内源抗体κ轻链基因座和Lamda轻链基因座被失活。