[发明专利]澳洲袋鼠爪花种苗的组培快繁方法

摘要

本发明涉及一种澳洲袋鼠爪花种苗的组培快繁方法，包括以下步骤：1)外植体取材与消毒；2)愈伤组织诱导；3)愈伤组织增殖和分化；4)诱导生根。本发明的澳洲袋鼠爪花种苗的组培快繁方法以组培快繁为方法对袋鼠爪花植物进行扩繁，在较短时间内获得大量性状稳定统一的优质种苗，可达到每年扩繁速度为1000-10000倍，组培苗生长健壮，根系发达，移栽成活率高，是一种理想的快繁技术，可满足国内袋鼠爪花规模化引种种植的需要。

主权项

一种澳洲袋鼠爪花种苗的组培快繁方法，其特征在于，包括以下步骤：1)外植体取材与消毒：于每年3‑5月份对处于生长季节的盆栽袋鼠爪花取材，取材前1周用1500倍恶霉灵杀菌，并作控水处理；取材时，工具用75％的酒精浸泡消毒1分钟，剪取母株幼嫩茎段，约2‑3cm，剥开外层，加适量的洗衣粉，流水冲洗15分钟后用吸水纸吸干水分，最后将茎段小心放入消毒烧杯中备用；在超净工作台上，先用75％酒精对茎段进行预消毒，时间15‑30秒，倒出酒精后用5％次氯酸钠溶液消毒5‑8分钟，倒出消毒液，无菌水清洗1次，再加入0.1％升汞溶液，1‑2滴表面活性剂，消毒8‑10分钟，无菌水冲洗材料5次以上；消毒过程中要注意轻轻摇匀，以提高消毒效果；2)愈伤组织诱导：消毒处理完毕，在超净工作台上，将茎段外层剩余叶片剥除，只留顶芽，接种于1/2MS+BA 1.0‑2.0mg/L+NAA0.05‑0.1mg/L+卡拉胶7g/L+Ad 1‰+蔗糖20g/L，pH＝5.8的培养基上；前7‑15天为暗室培养，培养温度25℃，后转为见光培养，光照强度2000lux，光周期12h/天，培养温度光培养时25‑28℃，暗培养时19‑22℃；3)愈伤组织增殖和分化：外植体接种至诱导培养基1个月后产生愈伤组织，并产生蓝色分泌物，愈伤组织转接至增殖培养基上，能够实现快速增殖，并同时分化出不定芽；之后每20天左右进行一次继代增殖，增殖系数≥5.0；培养条件为光照强度2000lux，光周期12h/天，培养温度光培养时25‑28℃，暗培养时19‑22℃；4)诱导生根：切取愈伤组织上1‑2cm的不定芽，将其接种到生根培养基上，培养条件为光照强度2000lux，光周期16h/天，培养温度光培养时25‑28℃，暗培养时19‑22℃；培养15天后，根系长至2‑3条，根长0.5‑1.0cm之间，可移植日光温室炼苗1周，光照强度 3000‑4000lux；炼苗后，出瓶种植于0‑10mm泥炭和珍珠岩比例为4∶1的混合基质中，成活率超过90％。