[发明专利]酸土环脂芽孢杆菌检测试剂盒及其检测方法

摘要

酸土环脂芽孢杆菌检测试剂盒及其检测方法，涉及生物检测试剂盒。提供一种快速、特异性强且成本低的酸土环脂芽孢杆菌检测试剂盒以及检测酸土环脂芽孢杆菌的方法。所述酸土环脂芽孢杆菌检测试剂盒包括：环介导等温扩增反应液、Bst DNA聚合酶、显色剂。检测酸土环脂芽孢杆菌的方法使用所述酸土环脂芽孢杆菌检测试剂盒，具体步骤：细菌DNA的提取：环介导等温扩增；显色检测。利用4条特殊设计的引物及具有链置换活性的Bst DNA聚合酶，在恒温条件下特异、高效、快速地扩增DNA，在1h内能达到109靶序列拷贝，可通过荧光染料来观察扩增效果。

主权项

酸土环脂芽孢杆菌检测试剂盒，其特征在于包括：1）环介导等温扩增反应液；所述环介导等温扩增反应液含有10×Thermopol反应缓冲液、10mmol/L dNTP、50mmol/L硫酸镁、20μmol/L酸土环脂芽孢杆菌上游内引物、20μmol/L酸土环脂芽孢杆菌下游内引物、20μmol/L酸土环脂芽孢杆菌上游外引物、20μmol/L酸土环脂芽孢杆菌下游外引物；酸土环脂芽孢杆菌上游外引物F3：CGGGTAGGCATCTACTTGTG；酸土环脂芽孢杆菌下游外引物B3：GCGGAAGATTCCCTACTGC；酸土环脂芽孢杆菌上游内引物FIP：GCCGTTACCTCACCAACTAGCTGAAAGATGCAACTGCATCGC；酸土环脂芽孢杆菌下游内引物BIP：GATGCGTAGCCGACCTGAGAGTGCCTCCCGTAGGAGTCT；2）Bst DNA聚合酶：含8个活性单位（U）/μl；3）显色剂：SYBR GREEN I荧光染料，1000×。