[发明专利]玉米MuDR转座子插入侧翼序列的分离方法在审
| 申请号： | 201210201905.6 | 申请日： | 2012-06-19 |
| 公开（公告）号： | CN102876667A | 公开（公告）日： | 2013-01-16 |
| 发明（设计）人： | 陶勇生;张祖新;王婷婷;杨伟峰 | 申请（专利权）人： | 陶勇生 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12N15/10 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 100041 北京市*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种玉米MuDR转座子插入侧翼序列的分离方法，包括第一、MuDR诱变材料的制取；第二、突变体材料的DNA提取；第三、巢式引物设计：在MuDR转座子TIR序列的保守序列设计巢式引物TIR9-1和TIR9-2序列，所述TIR9-1序列为：ATAGAAGCCAACGCCATGGCCTCCATTTCGTC，所述TIR9-2序列为：GGCCTCCATTTCGTCGAATCCCTT。本发明玉米MuDR转座子插入侧翼序列的分离方法通过巢式引物TIR9-1和TIR9-2的设计，能有效、便捷的实现MuDR转座子插入的侧翼序列的分离。 | ||
| 搜索关键词： | 玉米 mudr 座子 插入 侧翼 序列 分离 方法 | ||
【主权项】：
一种玉米MuDR转座子插入侧翼序列的分离方法，其特征在于：包括如下步骤： 第一、MuDR诱变材料的制取：用杂交方式构建诱变群体，并筛选出突变体材料；第二、突变体材料的DNA提取；第三、巢式引物和简并引物设计：在MuDR转座子TIR序列的保守序列设计巢式引物TIR9‑1和TIR9‑2序列，所述TIR9‑1序列为：ATAGAAGCCAACGCCATGGCCTCCATTTCGTC，所述TIR9‑2序列为：GGCCTCCATTTCGTCGAATCCCTT；简并引物是根据物种共享的蛋白质的保守氨基酸序列设计；第四、进行MuTAIL‑PCR反应，并在反应中添加甘油和二甲基亚砜；第五、MuDR转座子插入侧翼序列的真实性检测。
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