[发明专利]用于降低荧光原位杂交法中自体荧光干扰的检体前处理方法及其试剂套组有效
申请号: | 201210177626.0 | 申请日: | 2012-06-01 |
公开(公告)号: | CN103382499A | 公开(公告)日: | 2013-11-06 |
发明(设计)人: | 陈泽卿;黄琼瑰;李尚恩;徐圣琦 | 申请(专利权)人: | 长庚医疗财团法人林口长庚纪念医院 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;G01N21/64 |
代理公司: | 北京天平专利商标代理有限公司 11239 | 代理人: | 孙刚 |
地址: | 中国台*** | 国省代码: | 中国台湾;71 |
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摘要: | 一种用于降低荧光原位杂交法中自体荧光干扰的检体前处理方法,包含:步骤一:福尔马林固定石蜡包埋组织;步骤二:切片及烘片;步骤三:硫氰酸钠作用;步骤四:在面积24×32mm的组织加入20μl浓度5-10mg/mL第四型胶原蛋白酶或1mg/mL弹性蛋白酶,封片后于37℃作用0.5-1hr,来降解具有自体荧光特性的细胞外基质;步骤五:用胃蛋白酶在37℃作用。又本发明另提供可用于降低荧光原位杂交法中自体荧光干扰之检体前处理法的试剂套组,通过本发明来作检体前处理,可显著降低组织自体荧光现象,提高荧光探针信号与背景荧光比率,提升荧光原位杂交法的检验品质与正确性。 | ||
搜索关键词: | 用于 降低 荧光 原位杂交 干扰 检体前 处理 方法 及其 试剂 | ||
【主权项】:
一种用于降低荧光原位杂交法中自体荧光干扰的检体前处理方法,包含以下步骤:步骤一:福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)组织;步骤二:切片及烘片;步骤三:硫氰酸钠(NaSCN)作用;步骤四:在面积24×32mm的组织加入20μl浓度5‑10mg/mL第四型胶原蛋白酶或1mg/mL弹性蛋白酶,封片后于37℃作用0.5‑1hr,来降解具有自体荧光特性的细胞外基质;及步骤五:用胃蛋白酶(pepsin)在37℃作用。
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