[发明专利]一种梨茎尖组织培养快速繁殖方法

摘要

本发明属于植物细胞工程技术领域，公开了一种梨茎尖组织培养快速繁殖方法。本发明采用1/2MS为基本培养基，在对外植体消毒之后，依次经过芽的诱导、丛生芽的增殖培养与继代、以及生根培养，获得再生植株。本发明的方法操作简单，取材方便，成本低，可以在短时间内获得大量遗传性状一致的无性系繁殖苗，有效地解决梨自根苗快繁的技术问题，同时也为梨遗传转化奠定了基础，具有重大的实用价值。

主权项

一种梨茎尖组织培养快速繁殖方法，其特征在于该方法包括以下步骤：1）外植体的准备：取带芽枝条剪成单芽茎段，消毒后去除鳞片，切取裸芽接种于诱导培养基上；所述诱导培养基成分为1/2MS+6‑BA 0.8~1.2mg/L+IBA 0.05~0.3mg/L+GA1.0~3.0mg/L+20~35g/L蔗糖+3~10g/L琼脂，培养基pH值为5.8‑6.0；2）丛生芽的诱导：在诱导培养基培养10~20d待芽长到0.5~3cm，切取新梢转接到新的诱导培养基上，30‑40d新芽形成并生长，每3周在相同的培养基上继代1次，50~70d获得大量丛生芽；培养过程中，光照强度1500‑2000lx，光照15~18h/d，温度25‑28℃；3）继代培养：采用继代培养基进行丛生芽继代培养，每30‑40d继代增殖1次；培养条件为：光照强度1500‑2000lx，光照16h/d，温度25‑28℃；所述丛生芽继代培养基为1/2MS+6‑BA1.5mg/L+IBA 0.05~0.3mg/L+20~35g/L蔗糖+3~10g/L琼脂，培养基pH值为5.8‑6.0；4）生根培养：切取1‑1.5cm生长健壮的新梢转接到生根培养基上，暗处理5d后再转光下培养，培养50‑60d得到生根苗；培养条件为：光照强度1500‑2000lx，光照16h/d，温度25‑28℃；所述生根培养基为1/2MS+IBA0.3~1.0mg/L+50~70g/L蔗糖+3~10g/L琼脂，培养基PH值为5.8‑6.0。