[发明专利]一种人用流感病毒裂解疫苗的病毒裂解灭活方法有效
申请号: | 201210129270.3 | 申请日: | 2012-04-28 |
公开(公告)号: | CN102614508A | 公开(公告)日: | 2012-08-01 |
发明(设计)人: | 张雪梅;王亚军;赵大鹏;李晓波;张赐强;徐文;顾建阳;范宇红;匡科伟;毕业;任琦;刘荫;郭占龙;赵志芳;郭雪;刘旭光;孙丽娟;王春鹏;张玉辉;宋泽民;韩俊海;谷丽娟;吴业宏 | 申请(专利权)人: | 长春生物制品研究所有限责任公司 |
主分类号: | A61K39/145 | 分类号: | A61K39/145;A61P31/16;C12N7/06 |
代理公司: | 吉林长春新纪元专利代理有限责任公司 22100 | 代理人: | 魏征骥 |
地址: | 130062 吉林*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | 本发明涉及一种人用流感病毒裂解疫苗的病毒裂解灭活方法,属于生物制药领域,将梯密度离心纯化后的H1N1型、H3N2型或B型单价流感全病毒采取先纯化裂解,然后再灭活的方法,可提高病毒裂解效果,缩短灭活时间,提高灭活效率,明显降低灭活剂的用量,简化灭活操作步骤,降低染菌风险,减少灭活所需厂房、设施和能耗,增加灭活的均一性和稳定性。 | ||
搜索关键词: | 一种 流感病毒 裂解 疫苗 病毒 方法 | ||
【主权项】:
一种人用流感病毒裂解疫苗的病毒裂解灭活方法,其特征在于包括下列步骤:(一)、将梯密度离心纯化后的H1N1型、H3N2型或B型单价流感全病毒置于密闭容器中、其蛋白含量控制在2.0‑3.0 mg/ml,加入作用浓度为0.7%‑0.9%浓度的裂解剂Triton X‑100或作用浓度范围为0.7‑1.2%的Triton N‑101;置20℃‑25℃,振荡裂解;(二)、采用震荡装置进行震荡,震荡时间为采用Triton X‑100 震荡1.5‑2.5h,或采用Triton N‑101震荡4‑5h,超滤去除裂解剂;(三)、病毒灭活:灭活采用pH值7.2、用磷酸盐缓冲液PBS终浓度为0.1 M/L、EDTA终浓度为0.5mM/L的调配流感病毒灭活溶液,裂解后病毒液的蛋白浓度0.5‑1.0mg/ml,加入终浓度为200ug/ml的甲醛,2‑8℃震荡灭活,灭活时长:4‑5天。
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