[发明专利]杀菌肽LL-37的基因工程的表达及其制备方法和用途

摘要

杀菌肽LL-37的基因工程的表达及其制备方法及用途，包括合成编码杀菌肽LL-37的DNA序列，连接到适合的表达载体进行表达和纯化，其中编码杀菌肽LL-37的DNA序列，采用在大肠杆菌偏爱的密码子，在大肠杆菌融合表达系统表达的LL-37，占菌体总蛋白的20％左右。纯化后的融合蛋白经过溴化氰切断，得到目的多肽LL-37，经HPLC制备后得到纯度＞90％的LL-37粉末。低浓度的LL-37就可在人体外用制剂方面可发挥巨大的杀菌效果，其作为外用药物如皮肤感染的治疗。本发明的优点是将杀菌肽LL-37以融合蛋白形式表达并制备，工艺简单，每立升发酵液收率可达20mg，具有工业量产意义。

主权项

一种杀菌肽LL‑37的基因工程的表达方法，包括合成编码杀菌肽LL‑37的DNA序列，连接到表达载体：GST载体或pUC18载体或pEZZ载体，在原核表达系统大肠杆菌JM109中进行表达和纯化，其中LL‑37基因工程菌的表达载体中的单链DNA结构SEQ ID：‑CTG‑CTG‑GGT‑GAT‑TTC‑TTC‑CGT‑AAA‑AGC‑AAA‑GAA‑AAA‑ATC‑GGT‑AAA‑GAA‑TTC‑AAA‑CGT‑ATC‑GTT‑CAG‑CGT‑ATC‑AAA‑GAT‑TTC‑CTG‑CGT‑AAC‑CTG‑GTT‑CCG‑CGT‑ACC‑GAA‑AGC。