[发明专利]一种树上干杏的多倍体诱导方法

摘要

本发明涉及一种树上干杏的多倍体诱导方法，是针对新疆树上干杏这一独特品种进行组织培养及四倍体诱导的方法，该方法由新疆树上干杏无菌种子出芽、继代两次、秋水仙素诱导、染色体鉴定、流式细胞仪的分析、生根、温室炼苗七个步骤完成。本发明所述方法具有：将化学诱变与组织培养的结合，使得多倍体诱导中融入了组织培养的优点。相对于浸种法、涂抹法等途径来说更有优势。通过本发明所述方法有效的诱导和筛选出树上干杏多倍体，对于提高树上干杏产量和抗逆性等具有重要意义，有助于克服树上干杏在长期种植中出现的品种退化问题，进一步提高其市场竞争力。

主权项

一种树上干杏多倍体的诱导方法，其特征在于按下列步骤进行：a、将树上干杏种去除种皮后用100mg/L赤霉素溶液浸泡24h，再用清水浸泡24h进行预处理，然后用清水冲洗5min，在超净工作台上，用浓度为75％乙醇时间30s，0.1％HgCl2时间1min，15％H2O2时间20min依次进行消毒，再用无菌水冲洗6次，然后置于灭菌的滤纸上，待水分晾干接种于MS固体培养基上培养并置于培养室，培养室温度为20℃±1℃，光照时间16h/d，光照强度2000lx，进行30天的无菌培养；b、将步骤a培养的杏无菌种子苗，长到1‑2厘米切下，接种到固体培养基QL’+0.1‑0.8mg/L6‑BA+0.01‑0.08mg/LIBA+30mg/L蔗糖+琼脂7g/L中，pH5.88，进行18‑25天丛芽继代培养两次；c、将步骤b中的丛芽继代培养的单苗接种于含有0.2％‑0.8％的秋水仙素固体培养基QL’+0.1‑0.8mg/L6‑BA+0.01‑0.08mg/LIBA+30mg/L蔗糖+琼脂4g/L中，培养时间18天，温度25℃±1℃，光照时间16h/d，光照强度3000lx进行诱导两次，然后对诱导新叶芽分别按常规方法进行染色体检测和流式细胞仪测试，以确定诱导苗的倍性；d、将步骤c诱导苗接入固体培养基1/2DKW+0.1‑0.8mg/LIBA，在温度25℃±1℃暗培养12d进行生根；e、将步骤d生根的单苗，逐一从培养基中轻轻取出，洗去根部所带的琼脂，移入含有0.1‑0.8mg/LIBA溶液中浸泡4小时后移栽到草炭土中进行温室炼苗，经过20天组培苗长出新叶。