[发明专利]制备重组人源神经生长因子蛋白质的方法及复性液有效
| 申请号： | 201210080228.7 | 申请日： | 2012-03-23 |
| 公开（公告）号： | CN102628058A | 公开（公告）日： | 2012-08-08 |
| 发明（设计）人： | 钱永常 | 申请（专利权）人： | 杭州纽龙生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C07K14/48;C07K1/14 |
| 代理公司： | 北京德琦知识产权代理有限公司 11018 | 代理人： | 康泉;王珍仙 |
| 地址： | 311200 浙江省杭州市*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明涉及制备重组人源神经生长因子(rhNGF)蛋白质的方法及复性液，所述方法包括通过工程大肠杆菌表达rhNGF蛋白质，破碎表达rhNGF蛋白质的工程大肠杆菌菌体，离心收集rhNGF蛋白质包涵体，利用变性体系变性溶解包涵体以形成包涵体溶解后溶液，复性液以大于1080ml/min的流速加入到包涵体溶解后溶液中进行复性，纯化rhNGF蛋白质。所述复性液包含45～55mMTris-HCl，0～10mMβ-巯基乙醇，0～1mM二价铜盐，0.95～1.05mM EDTA，pH8.5～10.0。本发明的方法通过复性液瞬间加入稀释复性提高了复性率，降低了生产成本，且操作简单。 | ||
| 搜索关键词： | 制备 重组 神经 生长因子 蛋白质 方法 复性 | ||
【主权项】：
一种制备重组人源神经生长因子蛋白质的方法，该方法包括步骤①通过工程大肠杆菌表达重组人源神经生长因子蛋白质，②破碎表达所述重组人源神经生长因子蛋白质的工程大肠杆菌菌体，③离心收集所述重组人源神经生长因子蛋白质的包涵体，④利用变性体系变性溶解所述包涵体以形成包涵体溶解后溶液，⑤将复性液加入到所述包涵体溶解后溶液中进行复性，⑥纯化所述重组人源神经生长因子蛋白质，其中所述复性液以大于1080ml/min的流速加入到所述包涵体溶解后溶液中。
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