[发明专利]一种HPLC波长切换技术同时测定葛根，升麻、葛根药对及含升麻、葛根药对的制剂中多种成分含量的方法

摘要

一种HPLC同时测定葛根、升麻、葛根药对及含升麻、葛根药对的制剂中多种成分含量的方法，包括制备供试品溶液和葛根、升麻、葛根药对及含升麻、葛根药对的成分含量测定两个步骤。供试品溶液是取葛根、升麻、葛根药对及含升麻、葛根药对的制剂，相当于葛根药材0.5—1.5g，用乙醇回流提取方法制得。而成分含量测定采用对供试样品上ODS色谱柱、梯度洗脱和HPC波长切换实现同时测定1—8种成分含量。洗脱液为乙腈与磷酸水混合液。本发明可以作到更全面、更准确的控制葛根、升麻、葛根药对及含升麻、葛根药对的制剂质量的效果。

主权项

一种HPLC波长切换技术同时测定葛根，升麻、葛根药对及含升麻、葛根药对的制剂中1‑8种成分含量的方法，其特征在于采用波长切换和梯度洗脱同时测定1‑8种成分，包括下述工艺步骤：（1）、制备供试品溶液，分别盛装备用，其制备方法如下：取葛根，升麻、葛根药对及含升麻、葛根药对的制剂，相当于含葛根药材0.5‑1.5 g，精密称定，置圆底烧瓶中，加50%‑70%乙醇30‑50倍量，回流提取2‑3次，每次2‑3小时，放冷，再称定重量，用50%‑70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过；精密量取5‑10ml，置10‑25ml量瓶中，加30%‑50%乙醇至刻度，摇匀，即得；（2）、葛根，升麻、葛根药对及含升麻、葛根药对制剂的含量测定，采用高效液相色谱法，应用波长切换及梯度洗脱技术：取上述制备的一份供试品溶液，上ODS色谱柱，ODS色谱柱规格为150‑250×4.6‑6.0mm,2‑5μm，梯度洗脱；洗脱液为乙腈与磷酸水混合液，第一梯度洗脱采用乙腈5—9%：磷酸水95—91%的混合液，第二梯度洗脱采用乙腈9—9%：磷酸水91—91%的混合液，第三梯度洗脱采用乙腈9—12%：磷酸水91—88%的混合液，第四梯度洗脱采用乙腈12—13%：磷酸水88—87%的混合液，第五梯度洗脱采用乙腈13—16%：磷酸水87—84%的混合液，第六梯度洗脱采用乙腈16—22%：磷酸水84—78%的混合液，第七梯度洗脱采用乙腈22—22%：磷酸水78—78%的混合液，第八梯度洗脱采用乙腈22—32%：磷酸水78—68%的混合液，第九梯度洗脱采用乙腈32—42%：磷酸水68—58%的混合液，第十梯度洗脱采用乙腈42—60%：磷酸水58—40%的混合液；洗脱液流速为0.8—1ml/min；检测波长：第一时间段为247nm，第二时间段为250nm，第三时间段为259nm,第四时间段为261nm，第五时间段为248nm，第六时间段为261nm，第七时间段为248nm，第八时间段为261nm，可依次测定并计算出葛根，升麻、葛根药对及含升麻、葛根药对的制剂中1‑8种成分的含量，在上述色谱条件下，理论塔板数以葛根素计不低于25000，分离度＞1.5，上述百分比为体积百分比。