[发明专利]一种植物油中植物甾醇的检测方法

摘要

本发明涉及一种植物甾醇的检测方法，采用高效液相色谱仪进行检测，其主要包括以下步骤：样品制备，所述样品制备包括试样的皂化、乙醚提取皂化物、水洗乙醚提取物、过滤、旋转蒸发器蒸发溶剂收集滤液、微孔滤膜抽滤并定容；样品测试包括样品进样、检测结果的分析。本发明检测方法样品制备简单，成本较低，设备条件要求不高，且操作简洁。

主权项

一种植物油中植物甾醇的检测方法，其步骤如下：（1）样品的处理：首先称取0.1g～1g样品放于皂化瓶中，然后在皂化瓶中加入30mL～50mL质量分数为60% 的KOH水溶液和70mL～100mL的无水乙醇（分析纯），摇匀，最后加入3～4颗沸石；（2）样品的皂化：待步骤（1）完成后，将皂化瓶接于回流冷凝管上，在温度为90℃～100℃的条件下进行皂化，皂化时间为2h～3h；（3）提取皂化物：待步骤（2）皂化完成后，用30mL～50mL的无水乙醚（分析纯）提取剂提取皂化瓶中与沸石上的皂化物，将提取液转入分液漏斗Ⅰ中，静置待提取液分层后上层液体留于分液漏斗Ⅰ中，将下层液体移入分液漏斗Ⅱ中，然后在分液漏斗Ⅱ中加入无水乙醚（分析纯）进行反复提取3～4次，静置分层后将分液漏斗Ⅱ中的上层液体与分液漏斗Ⅰ的上层液体合并，得到最终的乙醚提取液；（4）乙醚提取液的处理:用30 mL～50mL质量分数为3%的NaCL水溶液反复清洗步骤（3）所得的乙醚提取液，振荡分层，弃去下层液体，重复清洗直到弃去的下层液体呈中性，得到的上层液体即为所需提取物；（5）提取物的处理：将步骤（4）中所得的提取物通过盛有5g无水硫酸钠的过滤器进行过滤，将所得的滤液置于旋转蒸发器的圆底蒸发瓶中，然后将圆底蒸发瓶连接蒸发仪器进行提取剂无水乙醚的蒸发，待无水乙醚完全蒸发后，得到所需植物甾醇，取下圆底蒸发瓶用纯乙醇多次清洗溶解圆底蒸发瓶中的植物甾醇，然后转入到100mL容量瓶中用纯乙醇定容，最后经0.45um的微孔滤膜过滤于25mL容量瓶中，试样的制备完成；（6）试样的测试：用进样针吸取步骤（5）所得的试样18 uL～22uL，在进样温度为40℃～50℃，波长为200 nm ～250nm,流速为0.5 mL/min～1.2mL/min的条件下采用高效液相色谱仪得到色谱图，然后利用外标法将色谱图中各甾醇的峰面积与相对应甾醇的标准曲线对照得出试样中各甾醇的浓度。