[发明专利]免疫亲和沉淀法纯化抗体有效
| 申请号： | 201210054083.3 | 申请日： | 2012-03-05 |
| 公开（公告）号： | CN102942627A | 公开（公告）日： | 2013-02-27 |
| 发明（设计）人： | 贺佑丰;袁鹏飞;吕东川;谷泽亮;张庚宽;王丁泉 | 申请（专利权）人： | 北京北方生物技术研究所 |
| 主分类号： | C07K16/00 | 分类号： | C07K16/00;C07K1/32 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 100076 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种免疫亲和沉淀法用于纯化抗体，其过程为：采用丙烯酰胺和丙烯酸为单体的共聚物固相微球作为固相载体，通过偶联剂——1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)-碳二亚胺(EDC)将抗原连接到固相载体上形成免疫吸附剂，将待纯化的抗体原液与免疫吸附剂混合，充分反应后形成抗体-免疫吸附剂结合物，通过离心洗涤除去未结合的其他混合物，得到单一的抗体-免疫吸附剂结合物，再降低体系中的pH值，则抗体被解离到溶液中，通过离心分离上清后对上清透析，即得到纯化的抗体。本发明建立了一种操作简便、适合大量生产、制备纯度达到免疫亲和层析级别抗体的方法。 | ||
| 搜索关键词： | 免疫 亲和 沉淀 纯化 抗体 | ||
【主权项】：
一种免疫亲和沉淀法用于纯化抗体，其特征包括以下步骤：采用含羧基(‑COOH)的以丙烯酰胺和丙烯酸为单体的共聚物固相微球作为固相载体，同含有氨基(‑NH2)的抗原混合，再加入偶联剂——1‑乙基‑3‑(3‑二甲基氨基丙基)‑碳二亚胺(EDC)，室温震荡反应过夜，从而将抗原连接到固相载体上，形成抗原‑固相载体的免疫吸附剂；然后，将待纯化的抗体原液与免疫吸附剂混合，2～8℃放置过夜，抗原抗体产生特异性结合，形成抗体‑免疫吸附剂结合物，通过离心洗涤，除去未结合的其他混合物，得到单一的抗体‑免疫吸附剂结合物；再降低体系中的pH值，则抗体被解离到溶液中，通过离心分离上清后对上清透析，即得到纯化的抗体；免疫吸附剂可通过离心洗涤后悬浮于保存液中，2～8℃放置，可重复用于纯化抗体。
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