[发明专利]V5抗原表位融合性酵母表达载体及构建方法无效

专利信息
申请号: 201210053179.8 申请日: 2012-03-02
公开(公告)号: CN102533843A 公开(公告)日: 2012-07-04
发明(设计)人: 李湘鸣;罗方妮;葛宜枝 申请(专利权)人: 扬州大学
主分类号: C12N15/81 分类号: C12N15/81;C12N15/66
代理公司: 南京知识律师事务所 32207 代理人: 卢亚丽
地址: 225009 *** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明涉及一种可与V5抗原表位相融合的酵母表达载体及其构建方法。所说的V5抗原表位相融合的酵母表达载体,是一种含有V5“标签”(tag)酵母表达载体,该“标签”可通过一个柔性短肽Gly-Ile-与下游基因相融合,不会影响下游表达蛋白的生物活性。其构建方法是:以Invitrogen公司的pYestrp2载体作为基本框架,将酵母强启动子GPD插入到pYestrp2载体中,构建成酵母表达载体pGPD,再将5′和3′端具有BamHI和EcoRI黏性末端V5抗原表位DNA,插入到pGPD相应的酶切位点,构建成V5融合性酵母表达载体pGPDV5。pGPDV5可通过柔性短肽与下游基因相融合。由于V5抗体已经商品化,故本发明可以方便、特异性、有效地验证外源性基因的在酵母细胞中的表达,且费用相对较低。
搜索关键词: v5 抗原 融合 酵母 表达 载体 构建 方法
【主权项】:
一种酵母细胞表达载体,其特征在于该表达载体具有V5抗原表位,V5抗原表位可通过柔性短肽Gly‑Ile‑与下游基因相融合,将该载体命名为pGPDV5。
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