[发明专利]抑制发芽/生根的大麦成熟胚组织培养法及所用培养基

摘要

本发明公开了一种大麦成熟胚离体培养基，包括诱导愈伤培养基、分化培养基和生根壮苗培养基。本发明还同时公开了利用上述大麦成熟胚离体培养基所进行的有效抑制发芽/生根的大麦成熟胚组织培养方法，包括以下步骤：1)、种子经消毒灭菌后，刮取胚作为离体胚接种到诱导愈伤培养基上；2)、将接种在诱导愈伤培养基上的离体胚放入22～26℃的培养箱中黑暗培养；3)、将所得的愈伤组织转到分化培养基上，22～26℃光照培养直至愈伤组织上长出2～3片的叶子；4)、将绿苗转到生根壮苗培养基上，22～26℃光照培养，直至绿苗长出≥2cm的根；5)、将绿苗在室内放置1～2天，洗去根上的培养基，得可移栽的苗。

主权项

大麦成熟胚离体培养基，其特征是：包括诱导愈伤培养基、分化培养基和生根壮苗培养基；所述诱导愈伤培养基的制备方法如下：每升诱导基液先调节pH为5.7～5.9，然后加入3.8～4.2g的植物凝胶；接着进行高温、高压的灭菌处理，最后加入过滤灭菌处理后的维生素B1 9～11mg、维生素B60.9～1.1mg和烟酸0.9～1.1mg；所述诱导基液由以下含量的组分组成：KNO3 2700～2900mg/L，(NH4)2SO4 440～480mg/L，KH2PO4 380～420mg/L，MgSO4·7H2O 175～195mg/L，CaCl2·2H2O 155～175mg/L，MnSO4·4H2O 22.0～22.6mg/L，ZnSO4·7H2O 8.4～8.8mg/L，H3BO3 6.0～6.4mg/L，Na2MoO4·2H2O 0.20～0.30mg/L，CuSO4·5H2O 1.20～1.30mg/L，CoCl2·6H2O 0.020～0.030mg/L，KI 0.80～0.86mg/L，Na2‑EDTA·2H2O 37.0～37.6mg/L，FeSO4·7H2O 27.6～28.0mg/L，脯氨酸580～620mg/L，谷氨酰胺240～260mg/L，水解酪蛋白380～420mg/L，肌醇90～110mg/L和蔗糖28～32g/L，其余为蒸馏水；所述分化培养基的制备方法如下：每升分化基液先调节pH为5.6～5.8，然后加入3.8～4.2g的植物凝胶；接着进行高温、高压的灭菌处理，最后加入过滤灭菌处理后的维生素B10.35～0.45mg和6‑苄基氨基嘌呤0.9～1.1mg；每升分化基液由以下含量的组分组成：KNO3 1800～2000mg/L，NH4NO3 160～170mg/L，CaCl2·2H2O 430～450mg/L，KH2PO4 160～180mg/L，MgSO4·7H2O 360～380mg/L，NaFeEDTA 38～42mg/L，H3BO3 6.0～6.4mg/L，MnSO4·4H2O 22.0～22.6mg/L，ZnSO4·7H2O 8.4～8.8mg/L，Na2MoO4·2H2O 0.20～0.30mg/L，KI 0.80～0.86mg/L，CuSO4·5H2O 0.020～0.030mg/L，CoCl2·6H2O 0.020～0.030mg/L，谷氨酰胺710～750mg/L，肌醇90～110mg/L和麦芽糖60～64g/L，其余为蒸馏水；所述生根壮苗培养基的制备方法如下：先在每升MS基本培养液中加入肌醇230～270mg、水解酪蛋白0.9～1.1g、脯氨酸680～700mg、麦芽糖28～32g，然后调pH值至5.8～6.0，接着加入植物凝胶3.8～4.2g，再进行高温、高压的灭菌处理，最后加入过滤灭菌处理后的维生素B10.35～0.45mg。