[发明专利]一种建立双启动子甲醇酵母高效表达重组人金属硫蛋白系统的方法及该蛋白的制备纯化无效
申请号: | 201210029329.1 | 申请日: | 2012-02-10 |
公开(公告)号: | CN102660574A | 公开(公告)日: | 2012-09-12 |
发明(设计)人: | 汪志友 | 申请(专利权)人: | 汪志友 |
主分类号: | C12N15/81 | 分类号: | C12N15/81;C12N15/66;C12N1/19;C12P21/02;C07K14/825;C07K1/14;C12R1/84;C12R1/78;C12R1/88 |
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摘要: | 本发明公开了一种制药工业可行的高效分泌表达、制备及纯化基因重组人金属硫蛋白或其类似物的生产方法,其特征为,通过将一种含甲醇应答元件AOX,以及含或不含金属应答元件MRE的外源金属硫蛋白基因的载体质粒pPICZα-MT,通过转染(transformation)或同源重组(double crossover recombination)的方式,将该含双启动子的外源基因引入相关宿主酵母细胞,构建了甲醇酵母宿主细胞中进行含双重启动子的表达工程细胞。本发明有效地避免了传统金属硫蛋白制备方法生产成本高,以及对动物大量宰杀与器官摘取、动物源病毒污染、细菌源内毒素污染、非人源化蛋白的免疫原等诸多问题。 | ||
搜索关键词: | 一种 建立 启动子 甲醇 酵母 高效 表达 重组 金属 蛋白 系统 方法 制备 纯化 | ||
【主权项】:
一种建立含双启动子甲醇酵母高效分泌表达基因重组人金属硫蛋白系统的方法及该目的蛋白的制备纯化技术。
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