[发明专利]一种检测烤烟根系分泌物中有机酸种类和含量的方法

摘要

本发明公开了一种检测烤烟根系分泌物中有机酸种类和含量的方法。包括波长选择、色谱条件选择、标准工作液制作、工作曲线绘制、样品前处理和样品测定，最后以不同有机酸保留时间定性，定量采用峰面积外标法，得到烤烟根系分泌物中有机酸的种类和含量。本发明填补了烤烟根系分泌物中有机酸种类和含量检测的空白。该方法可同时检测9种有机酸，10min即可完成分析，操作简单，检测速度快，重现性好，准确度高。使用常用检测设备，无需配置专门仪器，由一人即可独立完成。

主权项

一种检测烤烟根系分泌物中有机酸种类和含量的方法，包括以下步骤：(1)波长选择：选择210nm作为草酸、酒石酸、苹果酸、乳酸、乙酸、马来酸、柠檬酸、丁二酸和富马酸的检测波长；(2)色谱条件选择：采用磷酸二氢钾水溶液为流动相，磷酸二氢钾浓度为10mmol/L；用磷酸调节pH值，pH＝2.5；柱温为35℃；流速为1.0mL/mim，进样量为10μL，检测时间10min；(3)标准工作液制作：分别准确称取草酸、酒石酸、苹果酸、乳酸、乙酸、马来酸、柠檬酸、丁二酸和富马酸各0.1000g，用超纯水定容至1000mL，制成质量浓度为100μg/mL的有机酸混合储备液，将储备液分别稀释2倍、4倍、8倍、20倍、40倍和80倍作为标准工作液；(4)对各有机酸标准工作液浓度与其相应峰面积进行回归，并计算线性回归方程、线性范围、回收率、标准偏差、检测限和工作曲线；(5)样品前处理：采用水培法收集烤烟根系分泌物，体积为500mL，用二氯甲烷100mL萃取3次，收集有机相并用旋转蒸发仪浓缩至干，超纯水溶解定容至2mL，过0.45μm有机相滤膜，备用；(6)样品测定：采用自动进样器进样，以不同有机酸保留时间定性，定量采用峰面积外标法，得到烤烟根系分泌物中有机酸的种类和含量。