[发明专利]转DBR2基因提高青蒿中青蒿素含量的方法

摘要

本发明是一种生物技术领域的转DBR2基因提高青蒿中青蒿素含量的方法。本发明从青蒿中克隆青蒿醛Δ11(13)还原酶DBR2的基因，构建含DBR2基因的植物表达载体，用根癌农杆菌介导，将DBR2基因转入青蒿并再生出植株，PCR检测外源目的基因DBR2的整合情况，高效液相色谱法及蒸发光散射检测器测定(HPLC-ELSD)转基因青蒿中青蒿素的含量，筛选获得青蒿素含量提高的转基因青蒿植株。本发明获得的转基因青蒿中青蒿素的含量显著提高，最高达到非转化对照植株的2.83倍，从而提供了一种提高青蒿中青蒿素含量的方法，为利用转基因青蒿大规模生产青蒿素打下了基础。

主权项

一种转DBR2基因提高青蒿中青蒿素含量的方法，其特征是，包括如下具体步骤：(1)采用基因克隆方法获得青蒿关键酶基因DBR2；(2)把所述DBR2基因连结于表达调控序列，构建含DBR2基因的植物表达载体；(3)将所述含DBR2基因的植物表达载体转化根癌农杆菌，获得含所述DBR2基因植物表达载体的根癌农杆菌菌株；(4)利用所述含DBR2基因植物表达载体的根癌农杆菌菌株转化青蒿，获得经PCR检测的整合外源目的基因DBR2的转基因青蒿植株；(5)对所述转基因青蒿中青蒿素含量进行HPLC‑ELSD测定，筛选获得青蒿素含量提高的转基因青蒿植株。