[发明专利]一种吸附无细胞百白破联合疫苗的制备方法

摘要

本发明涉及利用百日咳、白喉、破伤风菌种培养类毒素制备百白破疫苗的方法，所述方法采用硫酸铵盐析、密度梯度离心、戊二醛脱毒的方式来制备包含有效抗原PT和FHA的无细胞百日咳原液，通过将制备所得到的百日咳原液与精致纯化得到的白喉类毒素和破伤风毒素混合最终制备得到可用于预防百日咳、白喉、破伤风三种疾病的无细胞百白破联合疫苗。

主权项

一种制备吸附无细胞百白破联合疫苗的方法，其通过将制备所得到的百日咳原液与精致纯化得到的白喉类毒素和破伤风毒素混合最终制备得到可用于预防百日咳、白喉、破伤风三种疾病的无细胞百白破联合疫苗，其特征在于，所述方法包括如下步骤：(1)采用包括戊二醛解毒步骤的方法来制备包含有效抗原PT和FHA的无细胞百日咳原液，其中戊二醛解毒是将梯度离心后的中间品用PBS稀释为50μgPN/ml，然后加入戊二醛使其最终浓度为0.5％，置于20℃脱毒，每1小时振摇一次，然后加入赖氨酸溶液，使其最终浓度为0.2％，置于20℃作用3小时；(2)采用包括甲醛解毒步骤的方法来制备白喉类毒素和破伤风毒素，其中制备白喉类毒素时甲醛解毒的具体操作条件为选择0.5％的甲醛，经调pH至7.0～7.2，在37～39℃下脱毒，然后加入赖氨酸(9.125％)，脱毒42天左右；制备破伤风毒素时甲醛解毒的具体操作条件为甲醛0.15％，放置于37℃温箱中加温脱毒25天。