[发明专利]配子体克隆法繁育巨藻幼苗新方法

摘要

一种配子体克隆法繁育巨藻幼苗新方法，利用毛细管分离技术在显微镜下将雌配子体上的一个雌细胞和雄配子体上的一个雄细胞分别分离下来，再利用克隆无性繁殖技术分别对雌细胞和雄细胞进行克隆，使雌细胞和雄细胞分别长成雌雄配子体，将配子体继续扩繁。当配子体扩繁到一定量时，将形成的细胞团用细胞捣碎机捣碎，将雌雄配子体进行混合，2周后，雌雄配子体分别释放卵子和精子，自发受精；受精后的合子放进营养盐中进行培育；10周后长成1.5cm左右的幼苗。本发明的受精过程及温度和光照的控制通过人工操作而实现，大大缩短了苗种生长的周期，同时利用毛细管分离技术从配子体中分离雌雄细胞进行克隆培育，提高了苗种的质量和产量，能够满足巨藻养殖，同时本发明方法繁育巨藻幼苗成本低廉。

主权项

一种配子体克隆法繁育巨藻幼苗新方法，其特征在于包括以下步骤：(1)克隆与扩繁当游孢子发育到配子体阶段时，利用毛细管分离技术在显微镜下将一个雌细胞和一个雄细胞分别从雌雄配子体中分离，再利用克隆无性繁殖技术对雌雄细胞进行克隆，分别培育雌雄细胞使其发育成雌雄配子体并将配子体进行扩繁；(2)受精当配子体扩繁到一定量时，将形成的细胞团分别用细胞捣碎机捣碎，将雌雄配子体进行混合，培育两周后雌雄配子体分别释放卵子和精子，自发受精；(3)孢子体培育受精后的合子放进营养盐中进行培育，并控制温度和光照强度；受精后1‑4周营养盐为在灭菌的海水中KNO31.8‑2.4×10‑4mol/L，KH2PO41.8‑2.4×10‑5mol/L，5‑10周营养盐为KNO32.8‑3.2×10‑4mol/L，KH2PO42.8‑3.2×10‑5mol/L；受精后1‑4周温度控制在8‑11℃，5‑10周温度控制在17‑19℃；光照强度为：受精后1‑2周10‑20μEm‑2s‑1；受精后3‑4周20‑40μEm‑2s‑1；受精后5‑10周40‑80μEm‑2s‑1。