[发明专利]高效表达人血小板因子4的基因工程菌及其构建方法

摘要

本发明公开了一种高效表达人血小板因子4的基因工程菌及其构建方法，所述工程菌的构建方法为：(1)人PF4基因的扩增；(2)PF4串联单位的扩增；(3)PF4多拷贝载体的构建；(4)构建多拷贝人PF4的基因工程菌。本发明构建了多拷贝人PF4的基因工程菌，与目前单拷贝的人PF4基因工程菌相比，大大提高了人PF4的表达量；通过在人PF4基因的DNA序列的N端加入纯化标签，只要进行一次亲和层析，便可得到较纯的人PF4融合蛋白，纯化步骤简便，比传统技术的多层层析更易于操作；通过在人PF4基因的DNA序列的N端加入蛋白酶酶切位点，C端加入终止密码子，只要进行一次酶解便得到人PF4样品，纯化简便，得率高。

主权项

一种高效表达人血小板因子4的基因工程菌，其特征在于所述基因工程菌为大肠杆菌BL21(DE3)，其携带的质粒中含有n个表达人PF4的基因，n＝1，2，3，4，5或6；质粒的启动子为IPTG诱导的T7Lac启动子，所述人血小板因子4为人PF4。