[发明专利]一种红花花粉氨基酸的制备方法

摘要

本发明涉及一种红花花粉氨基酸的制备方法，该方法是将红花的干燥花绒，加水浸泡，离心，得到浸泡液；再将剩余的红花渣加水浸泡，离心，得到浸泡液，合并二次浸泡液，过筛，加入纤维素酶，混悬均匀，放置，然后快速搅拌，静置，将沉淀物用抽滤，水洗，抽滤，获得纯红花花粉，再将花粉进行破壁处理，再通过活性炭柱与阳离子交换树脂柱串联使用，即可得到亮氨酸、组氨酸、赖氨酸和精氨酸四种氨基酸纯品。该方法完全采用人工操作，工艺简单，成本低，通过该方法获得的红花花粉氨基酸为白色晶体，无特殊气味，品种属完全纯正，与传统的蜜蜂采制的红花花粉相比，从而提高了红花的经济附加值，增加药农收入。

主权项

一种红花花粉氨基酸的制备方法，其特征在于按下列步骤进行：a、将红花的干燥花绒，按重量比加入5‑20倍量的去离子水浸泡，温度室温‑60℃，时间5‑10小时，800‑1400转转栏离心机离心，取得第一次浸泡液；b、将剩余的红花渣中按步骤a干燥花绒的重量比再次加入4‑8倍量的去离子水浸泡，温度室温‑60℃，时间5‑10小时，800‑1400转转栏离心机离心，取得第二次浸泡液，合并二次浸泡液，过筛网250‑350目，得到过滤浸泡液；c、将步骤b的浸泡液置于直径∶高＝1∶1‑3的透明或半透明的圆柱体容器中，加入纤维素酶，混悬均匀，在温度20‑60℃条件下放置6‑12小时得到酶化液体；d、将步骤c的酶化液体沿一个方向快速搅拌，然后立即反方向搅拌，使液体不再旋转，静置10‑60分钟，虹吸出上清液，再将沉淀物中按体积比加入去离子水10‑50kg，重复搅拌、静置和虹吸操作过程，至使花粉存留在容器底部；e、将步骤d花粉沉淀物用抽滤滤出水分，保持完整滤饼，再用去离子水洗涤至滤出液澄清无色，再用乙醇和乙醚梯度抽滤，倒出滤饼摊干，获得纯红花花粉；f、将步骤e的花粉通过超声、酶法或温差法，或三种方法集成做破壁处理，使花粉中的氨基酸释放出来，制成红花花粉破壁水溶液，在温度10℃下放置，时间3‑4天，析出大量悬浮和沉淀物，过滤，取得红花花粉水解液；g、将步骤f红花花粉水解液，用氨水调pH4.0，然后依次通过常规的活性炭柱和732型阳离子交换树脂柱，控制流速12毫升/分，在经 过纸层析、pauly反应、茚三酮反应和坂口反应检测，得到含有亮氨酸、组氨酸、赖氨酸和精氨酸的洗脱液；h、将步骤g含有亮氨酸、组氨酸、赖氨酸和精氨酸洗脱液按常规方法采用纸层析、pauly反应、茚三酮反应和坂口反应检测，依次进行精制：亮氨酸精制：pauly反应呈阴性部分减压浓缩，加活性炭脱色，放置冰箱静置过夜，析出结晶，过滤，重结晶再溶于温度80℃热水中，再进行活性炭脱色，放置冰箱静置过夜，析出结晶，过滤，滤液用浓度为95％乙醇洗涤、干燥，即可得到亮氨酸片状白色结晶；组氨酸精制：pauly反应呈阳性部分在温度70℃下浓缩除氨，反复3次，再用水稀释，用盐酸调pH3.0，加入活性炭脱色，浓缩，加入体积比2倍量浓度为75％乙醇，静置，有大量结晶析出，过滤，用浓度为75％和95％乙醇依次洗涤2次，将结晶用水溶解调pH2.5，再加入活性炭脱色，有大量结晶析出，过滤，再用浓度为75％和95％乙醇洗涤，干燥，即可得到组氨酸盐酸盐纯品；赖氨酸精制：pauly反应渐弱，茚三酮反应呈阳性的部分减压浓缩除氨，至小体积，加水，用HCl调pH4.0，加入活性炭脱色30分钟，过滤，结晶，用浓度为95％乙醇洗涤，干燥，得赖氨酸盐酸盐纯品；精氨酸精制：将坂口反应阳性洗脱液部分，合并减压除氨，用HCl调pH4.0，减压浓缩至有结晶析出，结晶，用浓度为75％乙醇浸泡，抽干，再用浓度为95％乙醇脱水，抽干，得白色结晶精氨酸盐酸盐纯品。