[发明专利]小反刍兽疫病毒b-ELISA抗体检测试剂盒及制备方法

摘要

本发明涉及生物技术领域，尤其是病毒抗体检测领域。本发明所述的小反刍兽疫病毒b-ELISA抗体检测试剂盒包括分别放置的小反刍兽疫核蛋白抗原、小反刍兽疫单克隆抗体、稀释液、强阳性血清、弱阳性血清、阴性血清、HRP羊抗鼠二抗、20倍浓缩洗涤液、底物液、终止液和酶链免疫吸附板。本发明通过实验优化，确定了试剂盒中各组分的最佳配比条件。其试剂盒可用于动物小反刍兽疫病毒抗体的快速诊断、检测，尤其适合于小反刍兽疫流行病学调查时大量样本的抗体检测。本发明的小反刍兽疫b-ELISA检测方法，检测原理、实验操作程序等均不同于BIRAD实验室的c-ELISA检测方法，试剂盒包含的小反刍兽疫核蛋白抗原、小反刍兽疫单克隆抗体均为自行研制。组装试剂盒的检测敏感性、特异性等指标均与国际认可的BIRAD实验室的c-ELISA检测方法相同。

主权项

一种小反刍兽疫病毒b‑ELISA抗体检测试剂盒，其特征在于主要包括分别放置的小反刍兽疫核蛋白抗原和小反刍兽疫单克隆抗体；所述的小反刍兽疫核蛋白抗原是由昆虫细胞表达的小反刍兽疫Nigeria75/1疫苗株核蛋白，核蛋白基因序列NCBI登录号为：X74443.2，表达蛋白分子量约61.3 kDa，由1578bp 核酸组成，编码526个氨基酸；所述的小反刍兽疫单克隆抗体是针对小反刍兽疫Nigeria75/1株核蛋白的特异性单克隆抗体，抗体免疫球蛋白重链和轻链分子量约55ku和26ku，染色体数目约99‑104条，相对亲和力指数为1.0 mol/L。